NEPA21原位貼壁電轉(zhuǎn)人原代脂肪前體細(xì)胞成功

      人脂肪前體細(xì)胞（Human Preadipocytes，HPAd）來源于人脂肪組織，呈成纖維狀，經(jīng)誘導(dǎo)可分化為成熟的脂肪細(xì)胞（Human Adipocytes，HAd）。HPAd來源的HAd常被用來研究胰島素誘導(dǎo)的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)、生長激素增強(qiáng)的脂類分解以及肥胖基因的表達(dá)等。HPAd和HAd可用于體外研究肥胖的原因和治療、II型糖尿病以及心血管疾病的模型。有趣的是，源于人網(wǎng)膜脂肪組織的HPAd和HAd在脂類分解和leptin表達(dá)上與源于皮下脂肪組織的存在顯著差異。
      眾所周知，原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染是不容易實(shí)現(xiàn)的，HPAd同樣如此，普通的轉(zhuǎn)染試劑，如脂質(zhì)體等，基本轉(zhuǎn)不進(jìn)去，即使用病毒感染，效率也很低。電轉(zhuǎn)染理論上可以作用于任何種類的細(xì)胞，但是由于技術(shù)的限制，電轉(zhuǎn)染技術(shù)一直未能在動(dòng)物細(xì)胞領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。NEPA21采用全新設(shè)計(jì)的電轉(zhuǎn)程序，特別適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞、離體組織或動(dòng)物活體的轉(zhuǎn)染。配合獨(dú)有的電壓衰減（Voltage Decay）設(shè)計(jì)，NEPA21可在獲得高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)，提高細(xì)胞存活率。

      2013年3月27日，華粵行細(xì)胞生物學(xué)團(tuán)隊(duì)在南京醫(yī)科大學(xué)進(jìn)行的人脂肪前體細(xì)胞進(jìn)行的原位貼壁電轉(zhuǎn)DEMO，盡管電轉(zhuǎn)前細(xì)胞融匯度已經(jīng)近乎100%，可是最佳轉(zhuǎn)染程序組的轉(zhuǎn)染效率仍能達(dá)到約35%，細(xì)胞存活率在95%以上。兩個(gè)課題組的老師對電轉(zhuǎn)染的效果給予了高度的評價(jià)。

     3T3-L1(Mouse embryonic fibroblast - adipose like cell line)雖為脂肪前體細(xì)胞系，但是用普通的轉(zhuǎn)染方法，同樣不容易獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。而電轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示（如下圖），NEPA21可以高效地轉(zhuǎn)染該種細(xì)胞及其分化成熟的脂肪細(xì)胞。

 
Preadipocytes, Fibroblast like before differentiation（In Suspension）

Adipocyte-like after differentiation(In Adherence)