在建立基因敲除(KO)細(xì)胞株后,我們必須對(duì)細(xì)胞株進(jìn)行充分的驗(yàn)證,以確保細(xì)胞株構(gòu)建成功。除了采用常規(guī)的PCR、測(cè)序等方法外,蛋白水平的Western blot(WB)驗(yàn)證也尤為重要。你有沒(méi)有經(jīng)歷過(guò),WB鑒定蛋白與PCR測(cè)序結(jié)果不一致?WB結(jié)果中無(wú)信號(hào)或顯示信號(hào)弱?
在WB驗(yàn)證中,偶爾會(huì)出現(xiàn)測(cè)序鑒定為KO純合子但WB檢測(cè)卻顯示有蛋白殘留。出現(xiàn)這種情況的原因眾多,其中由外顯子的可變剪切引起的蛋白殘留是最為復(fù)雜的,其影響因素包括細(xì)胞系的類(lèi)型,靶基因和細(xì)胞的培養(yǎng)環(huán)境等。總的來(lái)說(shuō),蛋白殘留跟gRNA的設(shè)計(jì)、基因(或mRNA)的可變剪切、WB抗體的選擇等因素都密切相關(guān)。
不過(guò)無(wú)需擔(dān)心!針對(duì)這些疑難雜癥,11月9日(周四)晚7點(diǎn),賽業(yè)生物細(xì)胞基因編輯生產(chǎn)經(jīng)理范麗莉?qū)?lái)「基因敲除細(xì)胞蛋白水平驗(yàn)證的挑戰(zhàn)和解決方案」線(xiàn)上課程,從基因敲除細(xì)胞系構(gòu)建、細(xì)胞株驗(yàn)證等多個(gè)應(yīng)用場(chǎng)景展開(kāi),為大家詳細(xì)講解基因敲除細(xì)胞系鑒定方法與技術(shù)特點(diǎn),以及優(yōu)化gRNA設(shè)計(jì)、提高編輯效率的實(shí)驗(yàn)技巧,通過(guò)具體操作案例分析實(shí)現(xiàn)體外疾病模型構(gòu)建的創(chuàng)新策略。
賽業(yè)生物自主開(kāi)發(fā)的細(xì)胞基因編輯系統(tǒng)Smart-CRISPR™,是基于人工智能技術(shù)所建立的綜合算法,通過(guò)最優(yōu)的gRNA設(shè)計(jì),結(jié)合抗體分析,及階段性WB測(cè)試等策略,為您提供科學(xué)的解決方案,讓您不再為KO細(xì)胞蛋白殘留問(wèn)題而發(fā)愁。“碼”上報(bào)名,相約云端,參與課程將有機(jī)會(huì)獲得藍(lán)牙耳機(jī)、數(shù)據(jù)線(xiàn)、小鼠公仔等驚喜好禮!
1.基因敲除細(xì)胞系相關(guān)研究及應(yīng)用場(chǎng)景
2.基因敲除細(xì)胞系構(gòu)建策略及課題解決方案
3.基因敲除細(xì)胞系鑒定方法與技術(shù)特點(diǎn)
4.基因敲除細(xì)胞系的使用及其常見(jiàn)問(wèn)題解析
02 講師簡(jiǎn)介
華南農(nóng)業(yè)大學(xué)畢業(yè),從事細(xì)胞基因編輯相關(guān)研究超7年,具有多年分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的研究經(jīng)驗(yàn)。
03 課程指南
針對(duì)基因敲除細(xì)胞株存在的構(gòu)建技術(shù)難點(diǎn),以及iPSC細(xì)胞單克隆制備復(fù)雜等問(wèn)題,賽業(yè)生物逐一給出了應(yīng)對(duì)措施及解決方案,并向大家提供具備參考價(jià)值的案例展示。如您想要了解相關(guān)內(nèi)容,或是查詢(xún)我們已有的客戶(hù)文獻(xiàn)發(fā)表,可掃碼下載這份《體外細(xì)胞模型解決方案》獲取更多信息。