培養(yǎng)基選用常見問題

選擇培養(yǎng)基沒有一定標準，有幾點建議可供參考：

    L－谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)時是重要的，脫掉氨基后， L－谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。 但L－谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定，在高溫下會分解成吡咯烷酮和羧酸，也有一些毒降解產(chǎn)物如NH4+會不可逆轉(zhuǎn)地損壞細胞壁。
    L-谷氨酰胺在不同溫度、不同pH值條件下的穩(wěn)定性研究如下。

    酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑，研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素），為避免固醇類反應，用無酚紅培養(yǎng)基。

    一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

    如圖所示，培養(yǎng)基pH值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈拋物線增長，當碳酸氫鈉加到一定量時，pH變化越來越小。而培養(yǎng)基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈直線增長，碳酸氫鈉量越大，滲透壓值越大。
    如果為了達到工作pH值僅加入少量的碳酸氫鈉，而忽略滲透壓，一來可能會達不到緩沖效果而引起細胞培養(yǎng)過程中pH值變化較劇烈，二來會使培養(yǎng)基成為低滲溶液，在培養(yǎng)細胞時易造成細胞膨脹破裂；如果為了達到工作pH值而加入大量碳酸氫鈉，一來可能會難以達到期望的pH值，二來會使培養(yǎng)基成為高滲溶液，在培養(yǎng)細胞時易造成細胞萎縮。
    生產(chǎn)中最好通過實驗找到合適滲透壓和pH值情況下的碳酸氫鈉加入量。下面是DMEM(HED)和MEM培養(yǎng)基的碳酸氫鈉與pH值、滲透壓的曲線。

    

    

    細胞生長質(zhì)量高是高表達的必要條件。

    采用細胞生產(chǎn)的疫苗是體外培養(yǎng)一定量的動物細胞并接種病毒，利用病毒在細胞內(nèi)增殖，得到預期的病毒抗原，然后制成疫苗。細胞生長質(zhì)量包括細胞密度和形態(tài)，沒有好的細胞生長質(zhì)量就不可能有高的表達量。
    但要注意的是，細胞生長質(zhì)量好、密度厚度大時候病毒接種量也應該相應增大，表達量才會提高，否則前期的高質(zhì)量細胞培養(yǎng)就可能浪費了。
    同時病毒、蛋白的表達、分泌在一定濃度下可能會飽和，因此如欲獲得高表達，還須研究合適的收液時間和次數(shù)。