專用氨基酸分析方案用于細胞培養(yǎng)過程監(jiān)控以及確定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)

簡介

沃特世近期推出的 AccQ•Tag™ Ultra 氨基酸專用分析方案有更高的分離度和靈敏度，確保用戶得到精確可靠的氨基酸定性和定量分析結(jié)果。這個方案來源于已經(jīng)被廣泛使用和認可的 AccQ•Tag 柱前衍生方法，得到的衍生物用沃特世 ACQUITY UPLC ® （超高效液相色譜）系統(tǒng)進行分離，可達到最佳分離度和更高的靈敏度，分析時間更短。系統(tǒng)控制，數(shù)據(jù)采集、處理和報告由 Empower™ 軟件進行。這是一個整體解決方案，針對不同應(yīng)用的儀器方法和數(shù)據(jù)處理方法都已經(jīng)在應(yīng)用光盤內(nèi)預(yù)先設(shè)定好，直接調(diào)用即可獲得進行分析。

UPLC 氨基酸分析應(yīng)用方案

設(shè)計重點與成功分析的關(guān)鍵

• 所有氨基酸都達到基線分離

• 對每個峰進行準確定性

• 衍生反應(yīng)副產(chǎn)物同氨基酸衍生物可以完全分離

• 3 個數(shù)量級的動態(tài)線性范圍，保證對不同濃度水平的氨基酸準確定量

• 足夠的電噴霧離子化靈敏度與穩(wěn)定性

衍生反應(yīng)過程示意圖

使用 AccQ•Tag Ultra 衍生試劑（ 6- 氨基喹啉 -N- 羥基琥珀酰亞氨基甲酸酯）對氨基酸進行衍生，伯氨基酸和仲氨基酸均可快速、定量完成衍生反應(yīng)，操作簡便，衍生反應(yīng)還可以自動化進行（ batch wise ）。

• 衍生反應(yīng)在大量水溶液存在的條件下進行，對不同緩沖液體系和不同組成的樣品均可得到可靠的結(jié)果

• 樣品無需進行特殊處理，也不需要真空干燥或提取

• 樣品經(jīng)衍生后的產(chǎn)物可穩(wěn)定保存幾天

• 過量的衍生試劑可在一分鐘內(nèi)水解為不干擾測定的 AMQ ，因此不需要去除過量衍生試劑的操作

• 衍生反應(yīng)副產(chǎn)物同氨基酸衍生物可以通過色譜達到完全分離

為監(jiān)測細胞培養(yǎng)過程中發(fā)酵液的成分，或者對發(fā)酵用培養(yǎng)基進行質(zhì)量控制，需要分離其它種類的氨基酸。與標準分析方法相比，分析細胞培養(yǎng)液中的氨基酸在分析方法的參數(shù)設(shè)置上有些不同： AccQ•Tag Ultra 洗脫劑 A （濃縮液）的稀釋倍數(shù)不同，還需要較高的柱溫。其它參數(shù)相同。