急速裂解法去除紅細(xì)胞

急速裂解法去除紅細(xì)胞      

器材和試劑： 
所有直接接觸細(xì)胞的用品和試劑必須無(wú)菌。
1. 標(biāo)注體積刻度的試管（圓錐形底）；
2. 巴斯德吸管（短型和長(zhǎng)型）；
3. 臺(tái)式離心機(jī)；
4. 培養(yǎng)級(jí)純凈水；
5. 2×Hanks平衡鹽溶液；
6. 儲(chǔ)存培養(yǎng)基，含10%血清；

實(shí)驗(yàn)方法：
1. 1000r/min離心原代細(xì)胞懸液5min，棄上清；
2. 向細(xì)胞沉淀中加入10ml培養(yǎng)級(jí)水，并用移液管輕輕來(lái)回吹打數(shù)次以重懸細(xì)胞（注：不同細(xì)胞的抗低張能力不同，控制暴露時(shí)間低于15s）；
3. 迅速加入等體積的2×Hanks平衡鹽溶液恢復(fù)張力，用巴斯德吸管輕輕混勻細(xì)胞懸液；
4. 再次1000r/min離心5min，檢查紅細(xì)胞沉淀。如果紅細(xì)胞仍大量存在，重復(fù)該步驟。否則在儲(chǔ)存培養(yǎng)基中重懸洗滌過(guò)的細(xì)胞；
5. 計(jì)數(shù)及檢測(cè)細(xì)胞活力后，放培養(yǎng)箱培養(yǎng)；