Ig亞類/鑒定/分型試劑盒使用說明書

 

 

您好！感謝您選擇了我們的產(chǎn)品，請您在讀完此說明書后再開始您的實(shí)驗(yàn)，這對您順利完成實(shí)驗(yàn)很有幫助。

一、試劑原理：本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類（可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA）。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包被微孔板，與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合，再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應(yīng)，最后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止，再通過酶標(biāo)儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本試劑盒具有極高的分辨率，是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。

 

三、使用范圍：用于小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。

1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫（大約30分），然后用純水把清洗液配成工作濃度（一份濃縮清洗液加19份純水）。

2、取出酶標(biāo)板。每個標(biāo)本需要6孔，陽性對照6孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。

3、將細(xì)胞培養(yǎng)上清（或特異親和純化的抗體）50μl加入酶標(biāo)微孔板，每個標(biāo)本加6孔，陽性對照也是加6孔每孔50μl。然后每孔再加入50μl標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

4、棄去板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。再在每個標(biāo)本的6孔中分別加入6種酶標(biāo)二抗各100μl，通用陽性對照的6孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

5、吸棄板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。

6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果，看顯色藍(lán)的那個孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液（每孔50μl）終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測定波長，630nm參考波長雙波長測定結(jié)果，參看高值孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。陽性對照0D小于0.5實(shí)驗(yàn)無效，需要重做。

 

五、產(chǎn)品特點(diǎn)：高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。當(dāng)然您如果覺得很多試劑自己可以準(zhǔn)備想省一筆費(fèi)用，那您可以登陸網(wǎng)站選擇我們?yōu)槟鷾?zhǔn)備的簡裝抗體鑒定產(chǎn)品C030215。當(dāng)然您也可以下次把標(biāo)本交給我們來做并且不會增加太多費(fèi)用��！

六、保存條件：2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過于頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短。

 

1、雖然本試劑盒過期后很久還有使用價值但還是請您在有效期內(nèi)使用。

2、在檢測腹水類單抗時要稀釋到1/5萬，雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜，有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的C030215抗體鑒定試劑。它會給您帶來滿意的結(jié)果。

3、手洗板子時一定要把孔加滿，停留10秒然后棄盡，最后要拍干凈。特別是在酶標(biāo)二抗溫育后洗板時一定要把酶吸出而不是甩出，要吸凈。這個在手工洗板時對結(jié)果很重要。

4、一次沒用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好，隨盒存放。

5、拿放板子時不要劇烈抖動，以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯誤結(jié)果。

6、出現(xiàn)異常結(jié)果請隨時咨詢我們。