細胞轉染方法、轉染效率低的原因及其解決方案介紹

轉染是將外源性基因導入細胞內的一種技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例；化學介導方法很多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法和多種陽離子物質介導的技術；生物介導方法，有較為原始的原生質體轉染和現在比較常用的各種病毒介導的轉染技術。

 

理想的細胞轉染方法應該具有轉染效率高、細胞毒性小等特點。病毒介導的轉染技術是目前轉染效率最高的方法，同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是，病毒轉染方法的準備程序復雜，常常對細胞類型有很強的選擇性，在一般實驗室中很難普及。目前非病毒介導的轉染技術中，轉染效率最高的方法是以陽離子非脂性物質為主的混合物配方。該類轉染物質介導的細胞轉染具有廣譜、細胞毒性小、性能穩(wěn)定等特點，而且不受培養(yǎng)液中的血清和抗生素的干擾，比脂質體介導的轉染方法更方便，因而在轉染技術領域逐漸占據主流地位。

需要指出的是，無論采用哪種轉染技術，要獲得最佳的轉染結果，可能都需要對轉染條件進行優(yōu)化。轉染效果的影響因素很多，如細胞類型、細胞培養(yǎng)條件和生長狀態(tài)、轉染方法、轉染操作細節(jié)等等。遇到問題，需要綜合考慮。