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如何用TL2010S組織破碎器快速高效破碎動(dòng)物心肺組織樣品

瀏覽次數(shù):3943 發(fā)布日期:2015-1-29  來源:www.dhsbio.com
第四軍醫(yī)大學(xué)某實(shí)驗(yàn)室近期解決了一件煩心事。他們在做藥物代謝原理分析實(shí)驗(yàn)時(shí),需要對采集到的大量的受試兔子心臟肌肉組織和肺部組織樣品進(jìn)行破碎處理,用于后續(xù)做不同方法的對比分析。然而,使用實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的組織勻漿器,不僅一次處理通量少、易污染且難清洗,處理后的樣品還不夠均勻細(xì)致,基本達(dá)不到做后續(xù)分析實(shí)驗(yàn)的要求。為此,實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一度無法大規(guī)模開展。201411月,實(shí)驗(yàn)室人員聯(lián)系鼎昊源科技,申請?jiān)囉?/SPAN>TL2010S組織破碎器(又稱TL2010S中通量組織研磨破碎器)進(jìn)行樣品破碎處理,在鼎昊源科技工程師現(xiàn)場協(xié)助下,終于摸索出批量快速高效破碎心肺組織樣品的好方法,主要有以下操作要點(diǎn):

1.將采集后的心肺組織粗樣分別置入5ml破碎器研磨管(或普通圓底離心管),每管置入量約占單管1/3體積為最佳;

2.在每個(gè)離心管中置入3顆直徑8mm的不銹鋼研磨珠,蓋好管蓋,將離心管對稱裝入適配器中,上搖臂固定;

3.TL2010S組織破碎器參數(shù)設(shè)置為轉(zhuǎn)速1800rpm、每研磨60秒自動(dòng)停止研磨10S且循環(huán)5次(即間歇研磨5分鐘);

研磨程序完全停止后,取出并打開離心管,破碎后的樣品狀態(tài)如下圖2現(xiàn)場照片所示,可見樣品破碎得非常均勻細(xì)致:

TL2010S組織破碎器實(shí)機(jī)照片

破碎心肺組織的效果現(xiàn)場實(shí)拍(使用普通5ml離心管)

1TL2010S組織破碎器實(shí)機(jī)照片

2:破碎心肺組織的效果現(xiàn)場實(shí)拍(使用的是普通5ml離心管)



為什么實(shí)驗(yàn)室人員之前使用常規(guī)組織勻漿器無法實(shí)現(xiàn)較好的破碎處理呢?


鼎昊源科技通過大量樣品破碎測試發(fā)現(xiàn),動(dòng)物組織類樣品本身相比其他樣品更難破碎,特別是一些結(jié)締組織、心臟組織、肺部組織,因?yàn)轫g性較大,一般很難用普通手工研磨或者常規(guī)組織勻漿器徹底破碎,所以也就無法滿足后續(xù)精細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求。而使用
TL2010S組織破碎器,可針對不同體積和數(shù)量的樣品,搭配不同規(guī)格的離心管及適配器,進(jìn)行多樣品的同時(shí)高速破碎。不僅操作靈活方便,還同時(shí)避免了樣品間的交叉污染,省去了清洗儀器的繁瑣工作。


為什么要選用5ml破碎器研磨管(或普通圓底離心管)呢?


我們知道
TL2010S組織破碎器還可搭配多個(gè)1.5/2.0ml離心管進(jìn)行研磨,但在本實(shí)驗(yàn)中,這種規(guī)格的離心管相對于要大量破碎的粗樣來說容量偏小,而且可容納的研磨珠也較小,所以撞擊力度有限,達(dá)不到最佳的研磨效果。而使用5ml破碎器研磨管(或普通圓底離心管),單管置入的樣品量不僅增加了,還可置入更大尺寸的研磨珠產(chǎn)生更大的撞擊力度,從而獲得更好的研磨效果。


為什么要設(shè)置間歇研磨破碎呢?


間歇研磨是
TL2010S組織破碎器一個(gè)特色功能之一。設(shè)置一定的間歇時(shí)間,可以有效減少樣品在持續(xù)高速研磨破碎中因快速升溫而發(fā)生降解的情況,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行提供保障。如果配合液氮低溫處理,可以更有效地降低樣品溫升,利于RNA提取等對溫度敏感的實(shí)驗(yàn)。


最后將快速高效破碎心肺組織的好方法總結(jié)成如下公式供大家參考:


快速高效破碎心肺組織的好方法=
TL2010S組織破碎器+5ml離心管及適配器+每管3顆直徑8mm研磨鋼珠+5分鐘間歇研磨(每60秒歇10秒,循環(huán)5次)

來源:鼎昊源(天津)生物科技有限公司
聯(lián)系電話:010-58650065
E-mail:chenyajing@herosbio.com

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