TetraOne KO——基因敲除技術的重大突破

 

近日，賽業(yè)生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球專利技術TetraOne基因敲除，一種不僅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6個月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脫靶效應困擾的革命性技術。TetraOneTM KO的出現(xiàn)，是ES打靶技術制備基因敲除鼠的一個重大突破。

 

 

傳統(tǒng)ES打靶、TALEN和CRISPR/Cas9是基因組編輯的三大技術及主要工具。新一代核酸酶基因編輯技術TALEN和CRISPR/Cas9作為現(xiàn)代分子生物學技術上的一次革新，它結合了轉基因技術簡便快速，沒有物種限制及ES細胞基因打靶技術精準的優(yōu)點，在短短的幾年時間里便受到廣大科研人員的青睞。但由于其脫靶效應至今無法避免，且難以勝任大片段的基因敲入，所以還遠遠談不上成熟。如何提高TALEN和CRISPR/Cas9的效率和降低脫靶效應將是未來的主要研究方向。

 

基于同源重組的ES打靶是基因敲除的業(yè)內金標準，它通過同源重組技術將外源基因定點整合入靶細胞基因組上某一確定的位點，以達到定點修飾改造基因組某一基因的目的。基因打靶技術目前已被廣泛認為是一種理想的特定修飾與改造生物體遺傳物質的最佳方法。尤其是條件性和誘導性基因打靶系統(tǒng)的建立，使得對基因在時間和空間上的靶位修飾更加明確、效果更加精確可靠。盡管如此，漫長的構建周期（需時8-12個月）卻使很多研究者望而卻步。

 

很明顯，TALEN、CIRSPR/Cas9和傳統(tǒng)ES打靶基因敲除技術有著互補的作用，而TetraOneTM KO技術卻是兩者優(yōu)勢的結合。這在目前基因組編輯的技術研究中，無疑是最為值得關注的新一代革命性技術。它使更加快速精準構建基因打靶小鼠成為可能。

 

 

 

賽業(yè)生物科技采用獨特的建系和基因改造技術建立了具有遺傳優(yōu)勢的TetraOne ES細胞系，通過在胚胎發(fā)育前期進行顯微注射，使TetraOne ES細胞100%代替內源ES細胞，實現(xiàn)跨越“嵌合體”階段從而一步直接獲得TetraOne小鼠的基因打靶專利技術。實驗結果顯示，TetraOne小鼠的特征均與傳統(tǒng)ES打靶技術產生的F1代小鼠一致。

 

 

賽業(yè)生物提供利用TetraOne KO技術構建的完全性基因敲除小鼠、條件性基因敲除小鼠及定點敲入小鼠的技術服務。其構建流程直接跨越了嵌合體階段，實現(xiàn)6個月完成構建的極速周期：

 

 

 

賽業(yè)生物科技集團是全球領先的多元化跨國生物科技實體，作為全球最大的轉基因/基因敲除模式動物商業(yè)技術平臺，賽業(yè)模式動物中心動物種群規(guī)模超過10萬只，每年可構建基因敲除鼠模型500例、轉基因鼠模型5000例以上，引用文獻已累計達600篇。目前已服務于全球數(shù)百個頂級生命科學實驗室和跨國制藥公司，是最受國際關注和認可的中國基因工程模式動物商業(yè)服務平臺。

 

2009年，賽業(yè)通過ISO9001:2008認證并于2012年順利通過復審，確保向廣大專家學者提供的所有產品和技術服務符合國際標準。AAALAC認證的順利通過，使賽業(yè)成為華南地區(qū)極少數(shù)個獲得國際實驗動物評估和認可委員會國際認證的單位之一。這不僅是實驗動物質量和生物安全水準的象征，更是國際前沿醫(yī)學研究的質量標志。

 

賽業(yè)公司目前在美國加州Santa Clara 建立起活體實驗鼠檢測、隔離中心，成為國內唯一一家具有活體實驗鼠類出口能力的生物企業(yè)；通過國家出入境檢驗檢疫部門的考核，成為華南地區(qū)第一家生物材料出入境綠色通道試點單位，加速了實驗動物出入境審批流程，并進一步提升了賽業(yè)模式動物中心國際服務的能力。