葉綠素測(cè)定儀的實(shí)驗(yàn)步驟

1.取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎(去掉中脈)，混勻。

2.稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95%乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。

3.取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤(rùn)，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，最后連同殘?jiān)�一起倒入漏斗中�?/P>

4.用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)�中無綠色為止。最后用乙醇定容至25ml，搖勻。

5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇為空白，在波長(zhǎng)665nm、649nm下測(cè)定吸光度。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：

將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.95A665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb：mg/L)，二者之和為總?cè)~綠素的濃度。最后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量：

葉綠素的含量(mg/g)= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重(或干重)。