ABGENT產(chǎn)品相關(guān)注意事項(xiàng)-抗體常見問題

ABGENT抗體是通過什么動(dòng)物來制備的？我們的單克隆抗體大多是通過BALB/c小鼠制備的，多克隆抗體大多是通過新西蘭兔制備的�？蛻艨贵w定制服務(wù)也主要是使用這兩種動(dòng)物

Western Blot檢測(cè)中你們是如何區(qū)分特異性目標(biāo)條帶的？

多克隆抗體的Western Blot檢測(cè)結(jié)果通常會(huì)出現(xiàn)多條帶，我們通過對(duì)免疫后血清和免疫前血清的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較：在抗體和免疫后血清中都出現(xiàn)而免疫前血清中未出現(xiàn)，且符合預(yù)測(cè)分子量的條帶，就可以認(rèn)為是特異性的目標(biāo)條帶。

為什么我買的抗體Western Blot檢測(cè)沒有陽性結(jié)果？

在ABGENT的Western Blot實(shí)驗(yàn)流程中有一些細(xì)節(jié)是避免背景深和沒有結(jié)果的關(guān)鍵。

① 不要過度清洗膜，膜的清洗使用含有0.1% Tween-20的TBS，3次，每次5分鐘即可。過度的清洗可能會(huì)把一抗洗掉。合適的清洗條件能夠很好的消除背景并得到最好的結(jié)果。

② 不要過長時(shí)間的封閉。過度的封閉會(huì)導(dǎo)致信號(hào)減弱。

③ 請(qǐng)確認(rèn)您所要檢測(cè)的抗原是否是產(chǎn)品說明書上所列舉的抗原種屬。

怎樣才能保證Western Blot實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性？

造成Wester Blot實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差的因素很多，可以從以下幾個(gè)方面考慮：

① 抗體的保存條件是否嚴(yán)格；

② 抗體稀釋后工作濃度很低不能反復(fù)使用；

③ 檢測(cè)樣品是否含有目標(biāo)蛋白？細(xì)胞裂解液中的目標(biāo)蛋白含量會(huì)因細(xì)胞數(shù)