【銳賽小課堂】miRNA研究之RNA提取試劑的選擇

 RNA提取試劑的選擇

RNA提取對(duì)于科研人員來(lái)說(shuō)并不陌生，但是要得到好的結(jié)果卻不是一件很容易的事情。事實(shí)上，現(xiàn)在市面上的豐富的RNA提取試劑基本上可以滿足科研人員的需要，為什么往往提取的RNA卻容易失敗呢？

RNA提取失敗的主要現(xiàn)象有三個(gè)：提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA純度低。究竟怎樣才能確保RNA提取的成功率呢？

首先，要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用抑制RNase的成分，但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵，但是由于種種原因無(wú)法立即從新鮮材料中提取RNA時(shí)，使用Takara公司的樣品保護(hù)劑 Sample Protector for RNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便，同時(shí)也可以有效解決組織、細(xì)胞樣品的短時(shí)間保存及運(yùn)輸問(wèn)題。此外，如果將不同時(shí)期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中，可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時(shí)序變化，減少實(shí)驗(yàn)組間的誤差。

其次，選擇合適的提取試劑是最重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時(shí)，操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對(duì)于動(dòng)物組織、簡(jiǎn)單的植物材料、各種微生物、培養(yǎng)細(xì)胞的total RNA提取，Takara公司的RNAiso Plus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRa MiniBEST Universal Total RNA Extraction Kit的成功上市，進(jìn)一步豐富了Takara RNA提取的產(chǎn)品線。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng)，無(wú)需苯酚氯仿抽提等步驟，簡(jiǎn)單快捷。組織或細(xì)胞裂解后，提取操作僅需20分鐘便可完成。

對(duì)于富含多糖多酚的植物類組織提取是個(gè)難點(diǎn)，Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRa MiniBEST PlantRNA Extraction Kit可以輕松解決這個(gè)問(wèn)題。TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit可以高效地從各種簡(jiǎn)單的植物組織材料（葉片、莖、幼苗等）、富含多糖多酚的植物組織材料（果實(shí)、種子等）、真菌提取高純度的TotalRNA，適用范圍廣泛。按照標(biāo)準(zhǔn)流程，本試劑盒可以有效地提取分子量大于200 nt的RNA，也可以按照可選步驟提取得到包含Small RNA(<200 nt)的Total RNA。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑，無(wú)需額外購(gòu)買(mǎi)其它試劑。

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