胰腺癌研究體內(nèi)外模型綜述

胰腺癌的預(yù)后非常差，其致死率基本等同于發(fā)病率。在美國(guó)，胰腺癌的5年生存率依然只有6%。關(guān)鍵的問題是胰腺癌患者在早期基本無癥狀，被診斷發(fā)現(xiàn)時(shí)大多數(shù)都處在晚期；全球每年胰腺癌致死的病人超過20萬人。

胰腺癌有多種類型，基本上劃分成外分泌腫瘤和內(nèi)分泌腫瘤兩種。99%的胰腺癌都屬于外分泌型腫瘤，其發(fā)病細(xì)胞來源于產(chǎn)生消化酶的胰腺細(xì)胞，該種類型有分為幾種亞型。其中差不多85%為胰腺腺癌，其發(fā)源于胰腺導(dǎo)管，而其中的60-70%為胰頭癌；另一種相對(duì)普遍的亞型是胰腺泡細(xì)胞癌，約占5%，類似內(nèi)分泌類型腫瘤，常常過度產(chǎn)生某種特定類型的分子；囊腺癌在胰腺癌中約占1%，預(yù)后相對(duì)其他外分泌類型較好；胰胚細(xì)胞癌是比較罕見的類型，常發(fā)生于兒童；此外還有腺鱗癌、印戒細(xì)胞癌、肝樣癌、膠樣癌、未分化細(xì)胞癌、破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞未分化癌。另外還有胰腺黏液性囊性腫瘤常常表現(xiàn)出不同的惡性程度，多數(shù)為良性。

研究過程中，為了驗(yàn)證基因的功能，我們常常需要做基因操作（過表達(dá)，干擾或者敲除），除了體外細(xì)胞水平驗(yàn)證以外，有些研究工作中還會(huì)涉及體內(nèi)研究。由于細(xì)胞的不同特點(diǎn)，常常導(dǎo)致基因操作的難易程度不一樣。慢病毒是一種非常高效的基因操作工具，不僅在細(xì)胞系中具有高效的表現(xiàn)，在做體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，也會(huì)經(jīng)常使用，比如原位組織注射研究基因的功能。下面我們就來看一看，胰腺癌研究中體內(nèi)外模型的選擇，以及病毒工具的應(yīng)用吧～

1、我需要哪種細(xì)胞模型？是否易于操作？

在進(jìn)行體外研究的時(shí)常常會(huì)采用各種細(xì)胞系，到目前為止，全球科學(xué)家建立了很多胰腺癌的細(xì)胞系，其中以胰腺腺癌為主。下表對(duì)主要的一些細(xì)胞系做了一個(gè)總結(jié)：

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2、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)效果不錯(cuò)，那動(dòng)物實(shí)驗(yàn)怎么做？

動(dòng)物模型可在腫瘤基礎(chǔ)性研究和抗腫瘤研究中發(fā)揮重要作用。胰腺癌研究中，增殖方向常用的體內(nèi)模型為裸鼠皮下成瘤，這里就不再贅述了。實(shí)驗(yàn)方法可參考出門左拐肝癌的總結(jié)文章，肝癌文章看這里～

另外，也可通過轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方式構(gòu)建自發(fā)性胰腺癌模型。但轉(zhuǎn)基因動(dòng)物成本高、周期長(zhǎng)，使用具有很大的局限性。今天就給大家介紹的一個(gè)厲害的：利用大熱的CRISPR/Cas9技術(shù)，直接向小鼠體內(nèi)原位胰腺腺管注射Cre慢病毒，有效敲除基因后導(dǎo)致腫瘤形成。

3、體內(nèi)外模型選好了，那么我的實(shí)驗(yàn)需要使用哪種慢病毒載體對(duì)基因進(jìn)行操作呢？

啟動(dòng)子、熒光標(biāo)記、抗性標(biāo)簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實(shí)驗(yàn)不同，這些元件也需要相應(yīng)變化。對(duì)于胰腺癌研究來說，若想實(shí)現(xiàn)組織特異性表達(dá)，可使用Insulin1、Insulin2、pdx1等胰腺組織特異性啟動(dòng)子。按例祭出神圖一張，定制你的專屬載體，就是這么簡(jiǎn)單！

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4、參考文獻(xiàn)

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長(zhǎng)按加關(guān)注