EBV所轉(zhuǎn)錄的miRNA BART1通過(guò)影響重要抑癌基因PTEN而促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移

Nature子刊揭示鼻咽癌轉(zhuǎn)移新機(jī)制

鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma, NPC）是我國(guó)華南地區(qū)常見的惡性腫瘤之一，主要發(fā)生于鼻咽腔頂部和側(cè)壁，長(zhǎng)期以來(lái)發(fā)病率一直為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首。我國(guó)每年鼻咽癌的新發(fā)病例達(dá)2.8萬(wàn)例，其中廣東地區(qū)鼻咽癌發(fā)病率占全國(guó)60%，死亡率超過(guò)5/10萬(wàn)，因此被稱“廣東瘤”。

目前認(rèn)為鼻咽癌的發(fā)生與EB病毒（Epstein-Barr Virus, EBV ）感染關(guān)系密切，其中95%以上的未分化型鼻咽癌組織中均可檢出該病毒的感染，因此，EB病毒及其編碼的miRNAs在鼻咽癌中的作用及機(jī)制一直是鼻咽癌研究的重點(diǎn)。

南方醫(yī)科大學(xué)蔡隆梅博士在其導(dǎo)師李欣教授的指導(dǎo)下研究發(fā)現(xiàn)EBV編碼的microRNA BART1（EBV-miR-BART1-3p）在鼻咽癌組織表達(dá)量明顯增高（圖1a），并且通過(guò)直接靶向腫瘤抑制基因PTEN而調(diào)控其依賴的多條信號(hào)通路（PI3K-Akt、FAK-p130Cas和Shc-MAPK/ERK1/2）誘導(dǎo)鼻咽上皮細(xì)胞發(fā)生間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT) （圖1b）,由此促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在《Nature Communications》(2016 IF:11.3)雜志上。

圖1.芯片發(fā)現(xiàn)EBV-miR-BART1在鼻咽癌組織中明顯高表達(dá)，并且調(diào)控多條信號(hào)通路促進(jìn)鼻咽癌轉(zhuǎn)移

蔡隆梅博士跟筆者分享了在進(jìn)行此項(xiàng)研究的時(shí)候遇到的一些難題及趣事。蔡博士首先利用上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司提供的慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定過(guò)表達(dá)EBV-miR-BART1的鼻咽癌細(xì)胞株，體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的較為順利。但是利用穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（裸鼠肝包膜注射）可謂是遇到不小的挑戰(zhàn)，如何將穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞準(zhǔn)確無(wú)誤的注入裸屬肝包膜下成為一個(gè)技術(shù)難點(diǎn)。

經(jīng)過(guò)多次不懈的努力嘗試，蔡隆梅博士終于順利完成了實(shí)驗(yàn)（圖2），并且形成了自己的裸鼠肝包膜實(shí)驗(yàn)方法，簡(jiǎn)稱“蔡式”法�，F(xiàn)分享如下：①固定：Pelltobarbitalum Natricum（100uL/10g）腹腔注射麻醉裸鼠，將裸鼠固定在泡沫板上。②消毒：酒精棉球、碘伏棉球分別消毒一次裸鼠胸腹腔皮膚。③注射：將 50ul 細(xì)胞懸液吸入注射器中，用注射器輕輕在肝左葉表面 10°進(jìn)針至肝包膜下，進(jìn)針后緊貼著肝包膜下平行前進(jìn)約 2-2.5cm；緩慢輕推注射器，將其內(nèi)細(xì)胞輕輕緩慢注射置肝包膜下；待細(xì)胞注射完緩慢將注射器抽出，并用碘伏棉球按壓注射口 2-5min。④縫合：用鑷子及碘伏棉球?qū)⒏闻K輕輕放回至腹腔；按解剖結(jié)構(gòu)逐層縫合切口。

圖2.裸鼠肝包膜注射實(shí)驗(yàn)證實(shí)：EBV-miR-BART1在體內(nèi)促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移

本項(xiàng)研究揭示EBV所轉(zhuǎn)錄的miRNA BART1通過(guò)影響重要抑癌基因PTEN而促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移，完整闡明了EBV-miR-BART1/PTEN信號(hào)軸，揭示EBV促進(jìn)鼻咽癌轉(zhuǎn)移的新機(jī)制，為鼻咽癌臨床干預(yù)策略開發(fā)指出新方向，具有重要研究意義。這一新觀點(diǎn)的提出為鼻咽癌研究提供一個(gè)新的突破口，為鼻咽癌的治療帶來(lái)新希望。

作者簡(jiǎn)介  
蔡隆梅博士，南方醫(yī)科大學(xué)腫瘤學(xué)博士、第六屆研究生會(huì)主席，主要研究方向?yàn)椋?#129;鼻咽癌轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)的機(jī)制研究；‚EB病毒在鼻咽癌中的作用及機(jī)制；腫瘤干細(xì)胞的放化療耐藥機(jī)制及探尋新治療靶點(diǎn)的研究。目前共發(fā)表鼻咽癌相關(guān)SCI 論文9 篇，發(fā)明專利 1 項(xiàng)，其中主要研究成果以第一作者身份在Nature communications（2016 IF:11.4），Oncogene，Oncotarget，Molecular cancer、PLos one等雜志發(fā)表，累計(jì)影響因子約為41.4。 

原文轉(zhuǎn)自：吉?jiǎng)P基因微信公眾號(hào)

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