靜脈給藥方法步驟介紹

小鼠靜脈注射區(qū)域主要有兩塊：一為尾根部左右兩側之靜脈，即常說的尾靜脈注射；另一為直接由眼球周圍注入眼窩之靜脈叢，稱之為內眥靜脈注射。

相比尾靜脈注射，內眥靜脈注射的操作更為簡單，對于新手來說是更佳的選擇。

主要方法為保定小鼠后，持注射器使針頭與鼠面成45°夾角，然后刺入下眼瞼與眼球之間，刺入深度約2-3mm。

但是該法有不少缺點：注射時容易將針刺入淚腺而使藥液從小鼠口腔和鼻腔中漏出；且小鼠也容易掙扎導致跑針；安全程度也比尾靜脈給藥更差。

所以內眥靜脈雖操作簡單，但是使用率并不廣泛，文獻支持也較少，僅作為靜脈注射的參考選項。

尾靜脈注射相對較難，但是請放心，小編在這里整理了史上最靠譜的尾靜脈注射方法，新手也能輕而易舉學會！

1、實驗前準備：

注射器選擇：尾靜脈注射選用一般的4號注射器就可以，但小編大多使用一次性的胰島注射器，它的針頭更細，更加適合尾靜脈注射。

注射部位選擇：小鼠的尾部有 2 條動脈和 3 條靜脈 ，2 條動脈分別在尾部的背側面和腹側面 ，3 條靜脈呈品字型分布，一般采用左右兩惻的靜脈。

小鼠固定：尤其對于初學者來說，小鼠的固定非常重要，固定不好的話往往會在好不容易進針后，小鼠突然松動，使針頭偏離出血管外導致前功盡棄，這樣是非常傷士氣的。尾注的固定方式主要使用專用的小鼠固定器，如下圖。 對于老手，為了方便，也可以直接通過金屬籠的孔位拉出尾巴。

2、操作步驟：

對于有毛的小鼠首先拔去沿尾部靜脈走向的毛，將小鼠尾巴置于40℃溫水中或使用75%酒精反復擦拭尾部，使尾巴血管擴張。

保定方式可以使用固定器，或將小鼠尾巴穿過PC盒鐵蓋之鐵絲間隙，大拇指和食指捏住并拉直尾巴，注意一定要拉緊，不能讓老鼠松動。

以酒精消毒后，針頭與尾巴呈20至30度角下針，下針時針尖斜面朝上，針尖進入靜脈時會有一瞬間通暢的感覺，若僅插入皮下則會持續(xù)感到針尖受阻；對于Balb/c類小鼠，針頭進入血管后亦可以很清晰的觀察到針孔顏色變暗。

開始注入藥物時應緩慢， 仔細觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現(xiàn)，說明已刺入血管，可正式注入藥物。

有的實驗需反復尾靜脈注射給藥，注射部位應盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動，更換血管位置注射給藥。

注射完畢后用無菌干棉球按壓30s止血。

尾靜脈的注射量為 5-10ul/g 。

3、經(jīng)驗總結：

3.1 注射前，使小鼠血管充盈可以大大提高注射成功率，盡量選擇血管清晰鼓脹發(fā)黑的部位進針。

3.2 進針時需盡量避開有白色結節(jié)的區(qū)域，通常來說有結節(jié)說明血管不夠充盈或是血管有損傷，若小鼠的尾巴從尾根到尾尖布滿密密麻麻的結節(jié)，還是放棄該小鼠為妙，就算是老手，難免也會抓狂。

3.3 雙手的手臂盡量可以靠在桌邊或是找一個支點靠著，以免在注射過程中抖動，導致注射失敗。