YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒使用說明

YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒

主要用途

YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑是一種旨在通過脂多糖親和樹脂過濾和吸附，達到去除樣品中細菌內(nèi)毒素的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細菌蛋白純化樣品的制備。產(chǎn)物可用于各種后續(xù)動物和細胞生物學操作。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作方便，清除效率滿意。

技術背景

內(nèi)毒素（Endotoxin）是一種脂多糖（Lipopolysaccharides；LPS），革蘭氏陰性細菌細胞膜的組成成分。在細菌蛋白包括融和蛋白純化過程中，細菌裂解釋放出內(nèi)毒素，伴隨著蛋白，嚴重干擾后續(xù)敏感的動物和真核細胞的實驗。YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素技術融入了脂多糖特異親和樹脂，即多聚賴氨酸覆蓋（polylysine coated）和陽離子交換基團官能化（functionalized cation exchange groups）超高交聯(lián)聚苯乙烯聚合物（hyper-crosslinked polystyrene polymers），充分有效地使樣品中的內(nèi)毒素過濾和清除達10微克/毫升，即2500至5000 EU/毫升。避免層析法的非特異性蛋白結合、免疫活性損失、和部分去內(nèi)毒素失效以及昂貴的缺點。

產(chǎn)品內(nèi)容

YIJI親和液（Reagent A）   3毫升

產(chǎn)品說明書                  1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

微型臺式離心機：用于沉淀親和樹脂

渦旋震蕩儀：用于混勻反應物

平式搖蕩儀：用于混勻反應物

實驗步驟

實驗開始前，從－70℃冰箱里取出待測蛋白樣品，置于冰槽里融化。然后進行下列操作。

• 加入1毫升蛋白懸液（1至5毫克蛋白總量）到1.5毫升離心管 
• 小心移取150微升YIJI親和液（Reagent A）到1.5毫升離心管 
• 蓋上蓋子，渦旋震蕩15秒
• 平放在平式搖蕩儀上，在4℃下孵育3小時至16小時，速度為100RPM
• 放進微型臺式離心機離心5分鐘，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf 5415D）
• 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管，避免黑色小粒
• 即刻放進－70℃冰箱里保存

注意事項

• 本產(chǎn)品為20次操作
• 本產(chǎn)品采用特殊樹脂法
• 使用1毫升槍頭，將槍頭尖端部分剪去，用于移取YIJI親和液（Reagent A）
• YIJI親和液（Reagent A）不能重復使用
• 100毫升菌液的平均內(nèi)毒素含量可高達15000 EU（30微克），介于5000至50000 EU
• 去內(nèi)毒素程度取決于樣品中內(nèi)毒素含量、樣品性質(zhì)（細菌來源、融合蛋白特性）和溶液狀況（pH、鹽離子強度等），可以通過多次處理，達到徹底清除的效果；如果效果不甚理想，建議使用YIJI蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒-YIJI30046.2
• 經(jīng)過本產(chǎn)品處理后的產(chǎn)物含有90％的蛋白成分以及100％的免疫源性
• 本公司提供系列內(nèi)毒素處理試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標準

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定去內(nèi)毒素顯著