一種活細胞倒置熒光顯微鏡溫度校準方法的介紹

活細胞培養(yǎng)熒光顯微鏡由于可以進行活細胞常規(guī)培養(yǎng)條件，例如：溫度控制，濕度控制，CO2濃度控制，O2濃度控制，同時配置高速攝像頭可以進行時間序列（Time-Lapse）,結(jié)合多色熒光濾片切換，LED單波長光源激發(fā)，可配備相差(Phase Contrast)，微分干涉（DIC），熒光等對照方式可以更加直觀詳細的進行細胞形態(tài)記錄而受到廣大科研用戶的認可。近年來，倒置熒光顯微鏡配置活細胞培養(yǎng)裝置的相關(guān)實驗越來越普遍，目前市面上集成的熒光成像系統(tǒng)很多，例如：GE公司的DELTAVISION活細胞成像系統(tǒng)，ZEISS公司的CELL OBSERVER系統(tǒng)，或其它大品牌公司的整套活細胞成像系統(tǒng)，價格昂貴（20萬美元以上），維護成本高，廠家工程師上門速度通常比較慢或者收費貴，常規(guī)實驗室難以負擔。目前各實驗室通常都配備有倒置熒光顯微鏡，活細胞培養(yǎng)裝置是模塊化設(shè)計的產(chǎn)品，廣州科適特科學儀器有限公司提供一種優(yōu)惠簡便的解決方案，定制整套活細胞或?qū)ΜF(xiàn)有的熒光顯微鏡進行活細胞升級，購置成本低，拆裝方便，兼容目前市場主流的各大顯微鏡平臺，例如：徠卡，尼康，奧林巴斯，蔡司等都可以提供定制的適配器。

活細胞培養(yǎng)裝置中溫度控制是一個重要的實驗參數(shù)，但是由于活細胞培養(yǎng)的探測器通常位于培養(yǎng)腔室的上壁邊緣，由于室溫（例如22℃）與培養(yǎng)箱中設(shè)定溫度（例如37℃）偏差比較大，溫度傳導散熱效應(yīng)，顯微鏡細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)皿中細胞真實的溫度難以達到設(shè)定溫度，為了保證真實培養(yǎng)溫度精確，顯微鏡活細胞培養(yǎng)在不同的實驗室環(huán)境首次使用前通常需要進行校準（Calibration）。

最近剛好廣州科適特科學儀器有限公司裝機的客戶有跟我們問到溫度校準的問題，順便以我們公司代理的IBIDI活細胞培養(yǎng)裝置為例介紹一下活細胞培養(yǎng)裝置溫度校準的問題。廣州科適特科學儀器有限公司是德國IBIDI活細胞培養(yǎng)產(chǎn)品的國內(nèi)授權(quán)代理，價格優(yōu)惠，發(fā)貨速度快。

一．顯微鏡活細胞裝置的組成通常包含活細胞培養(yǎng)腔體，控制模塊單元，加濕柱，連接導管，CO2氣瓶，壓縮空氣瓶等配件。

二、培養(yǎng)箱腔體由上蓋（LID）和加熱

底板（PLATE）組成，通過適配器固定在倒置顯微鏡的載物臺上，內(nèi)部有溫度探頭，氣體輸入輸出接口，控制面板可以設(shè)置氣體的流速，CO2及O2濃度等參數(shù)。

三．取出校準專用小工具，校準用溫度探頭，即一條可插入培養(yǎng)皿內(nèi)部的線纜。上蓋有開孔的校準培養(yǎng)皿。將探頭插入校準培養(yǎng)皿的小孔，用此探頭監(jiān)測實時培養(yǎng)皿內(nèi)部的溫度。目的是將內(nèi)部溫度設(shè)置為活細胞目標溫度（例如:37℃）。

四．打開溫度控制器電源開關(guān)，在控制器的前端LED面板上會顯示相關(guān)的參數(shù)�？刂破髯疃嗫梢钥刂�4個通道的溫度設(shè)置，活細胞培養(yǎng)裝置上蓋和底板是可以加熱的，通常只需要占用前面兩個通道，I指示的內(nèi)部探頭的溫度，S指示的設(shè)定溫度，E指示的是外部探頭的溫度。例如我們希望活細胞培養(yǎng)皿內(nèi)的溫度為37℃，則我們可以通過調(diào)節(jié)上蓋（通道1）和低加熱板（通道2）的設(shè)定溫度，當E指示的外部探頭溫度達到37℃，并能持續(xù)15分鐘保持不變。則校準工作完成。

五．校準工作完成后，記錄下上蓋（LID）和下加熱板（PLATE）的設(shè)定溫度。每次開始實驗工作時，只需要將設(shè)定溫度保持在我們已經(jīng)校準好的溫度，則可以認為培養(yǎng)皿內(nèi)部實驗環(huán)境的溫度可以保持在目標溫度，例如37℃。此過程類似于在開展活細胞培養(yǎng)實驗之前進行的預實驗。

六．倒置熒光顯微鏡活細胞培養(yǎng)模塊化設(shè)計，此設(shè)備可以兼容各大顯微鏡品牌，如果實驗室有多臺不同品牌倒置顯微鏡，只需要一臺即可隨用隨裝，方便實用。如果有問題可以咨詢廣州科適特科學儀器有限公司的服務(wù)工程師。