BCA法測定蛋白質(zhì)濃度原理

BCA法測定蛋白質(zhì)濃度原理：
BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠，即 BCA 工作試劑。在堿性條件下，BCA 與蛋白質(zhì)結(jié)合時，蛋白質(zhì)將 Cu2+ 還原為 Cu+，工作試劑由原來的蘋果綠色變?yōu)樽仙珡?fù)合物。562 nm 下其光吸收強度與蛋白質(zhì)濃度成正比。

BCA 蛋白濃度測定試劑盒，Abbkine的蛋白質(zhì)定量試劑盒(BCA法)提供一個簡單，快捷，兼容去污劑的方法，準(zhǔn)確定量總蛋白。

成分：
試劑 A，100 mL
試劑 B，2 mL
標(biāo)準(zhǔn)蛋白(BSA)1 mL×2，1 mg/mL

保存條件運輸溫度:室溫(標(biāo)準(zhǔn)蛋白 4~8 ℃ 運輸)

保存溫度:室溫(標(biāo)準(zhǔn)蛋白 -20 ℃ 保存)

有效日期:12 個月

使用方法：

方法一:96 孔板

1.配制 BCA 工作液:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按 50 體積試劑 A，1 體積試劑 B 配制適量 BCA 工作液。充分混勻。

2.將蛋白標(biāo)準(zhǔn)品按 0 μL，1 μL，2 μL，4 μL，6 μL，8 μL，10 μL 加入 96 孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中。加滅菌雙蒸水補足到 10 μL。取 10 μL 待測樣品加入 96 孔板的待測樣品孔中。每個測定要做 2~3 個平行。

3.向待測樣品孔和蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中各加入 200 μL BCA 工作液(即樣品與工作液的體積比為 1:20)，混勻。

4.37 ℃ 溫浴 30 min。冷卻至室溫。

5.酶標(biāo)儀 562 nm 波長下測定吸光度。

6.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線中求出樣品濃度。