DNA結(jié)合染料對細胞核的多色標記技術(shù)的多種應(yīng)用

細胞核是動物細胞器中最大的。在哺乳動物細胞中，核的平均直徑約為6μm，約占總細胞體積的10％。核包含細胞的大部分遺傳物質(zhì)，組織成多個長線性DNA分子，與多種蛋白質(zhì)（例如組蛋白）復合形成染色體。這些染色體內(nèi)的基因是細胞的核基因組。核的功能是維持這些基因的完整性，并通過調(diào)節(jié)基因表達來控制細胞的活性，因此，核是細胞的控制中心。組成核的主要結(jié)構(gòu)是核被膜，它包圍整個細胞器并從細胞質(zhì)中分離出其內(nèi)含物的雙膜和核骨架。

標記活細胞核

核綠 LCS1，核橙 LCS1，核紅 LCS1和核黃（Hoechst S769121）是DNA選擇性和細胞滲透染料，用于分析活細胞中的DNA含量。與DNA結(jié)合后，這些染料的熒光明顯增強。它們可用于熒光成像，酶標儀和流式細胞儀應(yīng)用。這些具有DNA結(jié)合力的染料可用于帶有適當濾波片組的活細胞的多色分析。
 

我們最新研發(fā)的核紫 LCS1是一種發(fā)熒光的，DNA選擇性和細胞滲透性染料，用于分析活細胞中的DNA含量。當與DNA結(jié)合后，核紫 LCS1的藍色熒光明顯增強。它可用于熒光成像，酶標儀和流式細胞儀應(yīng)用。它被405 nm的紫外激光很好地激發(fā)，并發(fā)出藍/藍綠色熒光，最大發(fā)射波長約為440 nm，為配備405 nm紫激光源的流式細胞儀提供了出色的染料。該DNA結(jié)合染料可通過Pacific Blue 和BD Horizo​​n V450濾波片組用于活細胞的多色分析。
 

圖1.活體HeLa細胞圖像被Nuclear Green LCS1染色。用紅色熒光Cell Navigator 線粒體染色試劑盒對活HeLa細胞的線粒體進行染色。

標記死細胞核

核綠 DCS1，核橙 DCS1和核紅 DCS1是DNA選擇性和細胞不滲透染料，用于分析死細胞，固定細胞或凋亡細胞中的DNA含量。與DNA結(jié)合后，DCS1染料的熒光明顯增強。它們可用于熒光成像，酶標儀和流式細胞儀應(yīng)用。這些具有DNA結(jié)合力的染料可用于具有適當濾波片組的死亡、固定或凋亡細胞的多色分析。

圖2.使用Apopxin 深紅色染料在Jurkat細胞中檢測磷脂酰絲氨酸的活性。 熒光圖像：活細胞（藍色）被CytoCalcein Violet 450染色，凋亡細胞（紅色）被Apopxin 深紅色染色，壞死細胞（綠色）被Nuclear Green DCS1染色。 使用1μM星形孢菌素誘導細胞凋亡3小時。 用Olympus熒光顯微鏡分別使用Violet，Cy5和FITC通道拍攝細胞的熒光圖像。 A：非誘導的對照細胞； B：星形孢菌素誘導的細胞的三重染色。
 

圖3.核綠 DCS1（Ex / Em = 503/526 nm，核橙 DCS1（Ex / Em = 514/555 nm）和核紅 DCS1（Ex / Em = 622/645。虛線是小牛胸腺DNA與碘化丙啶結(jié)合的發(fā)射光譜（Ex / Em = 535/617 nm）。

常用的細胞核染料

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