用特定標簽標記抗體已成為生物科學和醫(yī)學研究中的重要且常規(guī)程序,標簽的范圍從視覺標記(例如熒光染料)到半抗原分子(例如生物素),標簽的作用有增強免疫復合物和蛋白質-蛋白質相互作用的可見性,以及用于蛋白質的分離和純化。
在確定選擇哪種標簽類型時,應側重于抗體的下游應用。熒光標簽主要用于細胞成像,流式細胞儀,熒光印跡和免疫熒光應用,而酶標(例如HRP和AP)通常用于WB,ELISA和IHC應用。Hapten標簽(例如生物素)在可能的標簽選項中用途更為廣泛,因為它們可用于蛋白質分離和純化以及任何上述應用。
下面我們?yōu)槟峁┝巳卓贵w和蛋白質標記試劑盒供您選擇。這些試劑盒是專為初學者設計的,具有最簡單的操作規(guī)程和最少的操作步驟。
各類抗體標記試劑盒一覽
抗體標記試劑盒 |
ReadiLink™ 試劑盒 |
ReadiLink™xtra 試劑盒 |
Buccutite™ 試劑盒 |
每個反應標記的抗體量 |
50ug |
50ug |
25 µg,50 µg或1 mg |
標記原理 |
使用胺反應性染料靶向游離胺基 |
使用胺反應性染料靶向游離胺基 |
使用兩個專有的連接器以促進蛋白-蛋白結合 |
可用標簽 |
iFluor™染料,mFluor™染料,AlexaFluor®等價AF染料,FITC,Cy3,Cy5,Cy7,生物素 |
iFluor™染料,AlexaFluor®等效AF染料,FITC,Cy3,Cy5,Cy7 |
PE,APC,串聯染料,HRP,AP |
標簽和抗體之間的鍵類型 |
共價 |
共價 |
共價 |
是否與BSA或其他穩(wěn)定劑兼容 |
否 |
是 |
否 |
是否需要純化 |
否 |
否 |
否 |
共軛所需的時間 |
1小時 |
1小時 |
2小時 |
操作時間 |
約10分鐘 |
約10分鐘 |
約15分鐘 |
批次間差異 |
小 |
小 |
小 |
應用 |
成像,FC,IF,WB |
成像,FC,IF,WB |
FC,IF,IHC,WB,ELISA |
一、ReadiLink™快速抗體標記試劑盒
ReadiLink™快速抗體標記試劑盒提供了一種快速便捷的方法,可以使用我們的iFluor™染料,mFluor™染料或其他標記物來標記微量的抗體。ReadiLink™試劑盒的獨特化學性質使研究人員無需純化步驟即可輕松標記和回收100%的抗體。由于ReadiLink™共軛物被共價標記,因此可以長期保存,非常適合要求苛刻的應用,包括熒光顯微鏡,多色成像,多重流式細胞術,一級檢測,IHC,FISH,ELISA等。
ReadiLink™快速抗體標記試劑盒的主要功能:
1.標記單克隆抗體,多克隆抗體或其他蛋白質
2.可用于標記100 µg抗體(兩次分別標記50 µg抗體的反應)
3.100%的抗體回收,不需要的產物的純化
4.共軛物可在1小時內投入使用,動手時間最短約為10分鐘
5.可選擇iFluor™染料,mFluor™染料,AlexaFluor®equivalent AF染料,FITC,Cy3,Cy5,Cy7,BSA,KLH或生物素
6.避免使用任何含胺的緩沖液(例如Tris或甘氨酸)
7.標記前必須去除蛋白穩(wěn)定劑(例如BSA或明膠),對于需要與BSA兼容的抗體標記,請使用ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒
方便的設計以取得最大的效果:
ReadiLink™快速抗體標記試劑盒利用胺反應性標記來制備共價標記的結合物。這些反應性標記選擇性地靶向并結合至目標抗體上的伯胺(例如賴氨酸殘基)。要標記您的抗體,只需將您的抗體溶液(濃度約1 mg / mL)與ReadiLink™反應緩沖液混合,將混合物添加到預先配制的標記瓶中,然后孵育30至60分鐘。最后,將TQ™染色淬滅緩沖液添加到混合物中并充分混合。這部分很關鍵,因為它消除了背景干擾且不需要色譜柱純化步驟。孵育10分鐘后,即可使用標記物。
ReadiLink™——Lightning-Link®抗體標記試劑盒的高性能替代品
標簽套件 |
CD4(SK3)-共軛 |
染色指數 |
ReadiLink™ Kit |
CD4-iFluor™488共軛物 |
43 |
Lightning-Link® Kit |
CD4-AlexaFluor®488共軛物 |
26 |
圖2.人PBMC細胞的流式細胞儀分析。用ReadiLink™Rapid iFluor488抗體標記試劑盒(貨號:1255)或Lightning-Link®Rapid AlexaFluor®488制備的抗人CD4抗體。使用FITC通道中的ACEA NovoCyte流式細胞儀監(jiān)測熒光信號。
表1. ReadiLink™快速抗體標記試劑盒選擇指南
熒光團 |
對應替代的熒光團 |
Ex / Em(nm) |
熒光成像 |
流式細胞 |
貨號 |
mFluor™Violet 420 |
Cascade® Blue |
398/411 |
-- |
是 |
1105 |
iFluor™Violet 350 |
AMCA,AlexaFluor®350 |
345/442 |
是 |
-- |
1220 |
mFluor™Violet 450 |
Pacific Blue® |
403/454 |
-- |
是 |
1100 |
mFluor™Violet 510 |
-- |
414/508 |
-- |
是 |
1110 |
iFluor™488 |
FITC,AlexaFluor®488 |
491/514 |
是 |
是 |
1255 |
FITC |
-- |
494/520 |
是 |
是 |
1299 |
mFluor™Violet 540 |
Pacific Orange® |
405/537 |
-- |
是 |
1114 |
Cy3 |
-- |
555/565 |
是 |
-- |
1290 |
iFluor™555 |
Cy3,AlexaFluor®555 |
552/567 |
是 |
-- |
1227 |
mFluor™Blue 570 |
R-PE |
553/570 |
-- |
是 |
1120 |
二、BSA兼容的ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒
具有BSA兼容性的ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒將一抗標記帶到了全新的便利水平。ReadiLink™xtra試劑盒將優(yōu)化的標記方案與經過特殊配制的標記瓶組合在一起,可在常見緩沖液添加劑和蛋白穩(wěn)定劑的存在下快速,可重復地標記微量的一抗。僅需兩個簡單步驟,無需進行過柱純化,即可共價標記適用于任何基于免疫的應用的抗體。
ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒的主要功能:
1.與BSA和其他蛋白穩(wěn)定劑兼容
2.標記單克隆抗體,多克隆抗體或其他蛋白質
3.標記100 µg抗體(兩次分別標記50 µg抗體的反應)
4.100%的抗體回收,不需要產物純化步驟
5.共軛物可在1小時內投入使用,動手時間最短約為10分鐘
6.可選擇iFluor™染料,mFluor™染料,AlexaFluor®等效AF染料,FITC,Cy3,Cy5或Cy7
表2. ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒
名稱 |
Ex(nm) |
Em(nm) |
規(guī)格 |
貨號 |
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™350抗體標記試劑盒 |
344 |
448 |
2個標簽 |
1950 |
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™488抗體標記試劑盒 |
491 |
516 |
2個標簽 |
1955 |
ReadiLink™xtra Rapid AF488抗體標記試劑盒 |
499 |
520 |
2個標簽 |
1978 |
ReadiLink™xtra Rapid FITC抗體標記試劑盒 |
491 |
516 |
2個標簽 |
1970 |
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™555抗體標記試劑盒 |
556 |
569 |
2個標簽 |
1958 |
ReadiLink™xtra Rapid AF555抗體標記試劑盒 |
553 |
568 |
2個標簽 |
1980 |
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™594抗體標記試劑盒 |
587 |
603 |
2個標簽 |
1960 |
ReadiLink™xtra Rapid AF594抗體標記試劑盒 |
590 |
618 |
2個標簽 |
1982 |
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™647抗體標記試劑盒 |
654 |
669 |
2個標簽 |
1963 |
ReadiLink™xtra Rapid AF647抗體標記試劑盒 |
650 |
671 |
2個標簽 |
1985 |
三、Buccutite™蛋白到蛋白標記試劑盒
Buccutite™交聯技術提供了一種簡便的方法,可以用辣根過氧化物酶(HRP),堿性磷酸酶(AP)或藻膽蛋白共價標記蛋白質和抗體。與傳統(tǒng)的蛋白質-蛋白質結合技術(例如SMCC化學標記方法)相比,Buccutite™結合顯著增強了穩(wěn)定性,降低了要求。這些試劑盒可在不到兩個小時的時間內對微克抗體(每個標記反應低至25 µg)進行最佳標記,而無需純化,且收率100%。使用Buccutite™標記試劑盒,可以常規(guī)制備經共價標記的結合物,這些結合物能夠承受典型的免疫測定(例如ELISA,IHC和Western blot)或流式細胞儀應用中通常需要的嚴格洗滌技術。
Buccutite™快速抗體標記試劑盒的主要功能
1.標記25 µg至1 mg抗體
2.標簽的選擇包括HRP,AP,藻紅蛋白(PE),別藻藍蛋白(APC),PerCP,PE串聯染料和 APC串聯染料
3.不到2小時的標記時間,無需純化
4.100%抗體回收
Lightning-Link®抗體標記試劑盒的高性能替代品
標簽 |
CD4(SK3)-共軛 |
染色指數 |
Buccutite™ kit |
CD4-PE共軛物 |
55 |
Lightning-Link® kit |
CD4-PE共軛物 |
28 |
圖3. 人PBMC細胞的流式細胞儀分析。用Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒(目錄號:1310)或Lightning-Link®PE制備的抗人CD4抗體。使用ACEA NovoCyte流式細胞儀在FITC通道中監(jiān)測熒光信號
表3. Buccutite™快速抗體標記試劑盒
名稱 |
Ex(nm) |
Em(nm) |
規(guī)格 |
貨號 |
Buccutite™快速蛋白質交聯試劑盒*經過微尺度優(yōu)化,可在每個反應中標記100 ug抗體* |
-- |
-- |
2個標簽 |
1315 |
Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯試劑盒*針對標記1 mg蛋白進行了優(yōu)化* |
-- |
-- |
1 kit |
5504 |
Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯試劑盒*針對標記100 ug蛋白進行了優(yōu)化* |
-- |
-- |
1 kit |
5503 |
Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯試劑盒*針對標記25 ug蛋白進行了優(yōu)化* |
-- |
-- |
2個標簽 |
5505 |
Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微尺度優(yōu)化* |
565 |
575 |
2個標簽 |
1310 |
Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒*經過微尺度優(yōu)化,可標記每個反應25 ug抗體* |
565 |
575 |
2個標簽 |
1312 |
Buccutite™快速PE-Texas Red Tandem抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優(yōu)化* |
565 |
600 |
2個標簽 |
1318 |
Buccutite™快速PE-Texas Red Tandem抗體標記試劑盒*針對每次反應標記25 ug抗體的微尺度優(yōu)化* |
565 |
600 |
2個標簽 |
1343 |
Buccutite™快速PE-Cy5串聯抗體標記試劑盒*針對每次反應可標記100 ug抗體的微量優(yōu)化* |
565 |
674 |
2個標簽 |
1322 |
Buccutite™快速PE-Cy5串聯抗體標記試劑盒*優(yōu)化用于每次反應標記25 ug抗體的微量分析儀* |
565 |
674 |
2個標簽 |
1340 |
作為一家具有高端的技術實力、先進的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術開發(fā)區(qū),服務面向全國。艾美捷科技是集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產品、整合的解決方案,及優(yōu)質的物流服務。為了更好的服務客戶,公司組建了一支經驗豐富的研發(fā)團隊-艾美捷生物技術中心,進入研發(fā)生產階段,將更優(yōu)質的產品推薦給國內生物領域的同仁們!
艾美捷科技與國內外優(yōu)秀的生物試劑供應商優(yōu)保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短時間內為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產品及物流服務。