隨著國內(nèi)疫情得到有效控制,今年各屆學(xué)子終于可以到學(xué)校繼續(xù)學(xué)習(xí)和實(shí)驗(yàn)啦,相信有不少做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)又要開始瘋狂扎身細(xì)胞房去觀察細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞遷移等一些相關(guān)實(shí)驗(yàn)。但是這些實(shí)驗(yàn)過程耗費(fèi)了太多的精力,常常需要熬夜進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)拍攝。不僅如此,細(xì)胞在強(qiáng)光激發(fā)下,由于光漂白和光致死,也無法實(shí)現(xiàn)長時(shí)間監(jiān)測。
Case1. 監(jiān)測尿酸及其衍生物對腦內(nèi)皮細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的影響
方法:將不同濃度KYNA(尿酸)處理后GP8細(xì)胞置于Holomonitor®M4 X20目鏡下對細(xì)胞面積、厚度、運(yùn)動(dòng)路徑、速度等進(jìn)行觀察,每30秒捕獲一次,持續(xù)2小時(shí)。
結(jié)果:通過儀器數(shù)據(jù)整合處理后可以直觀的反映KYNA處理后對細(xì)胞的影響。由圖1可知,尿酸對Gp8細(xì)胞遷移、運(yùn)動(dòng)速度及運(yùn)動(dòng)速率均具有一定抑制作用。
圖1.尿酸對Gp8細(xì)胞遷移、運(yùn)動(dòng)速度及運(yùn)動(dòng)速率的影響
參考文獻(xiàn):xEszter,Lajkó,Bernadett,Tuka.Kynurenicet al. acid and its derivatives are able to modulate the adhesion and locomotion of brain endothelial cells.[J].Journal of neural transmission,2018,125(6):899-912.
Case 2. 監(jiān)測蓖麻毒素作用后細(xì)胞系的形態(tài)變化
方法:將Hela細(xì)胞接種于6孔板中,孵育6-8h使細(xì)胞貼壁,隨后加入一定濃度蓖麻毒素,并用Holomonitor®M4以10分鐘的時(shí)間間隔記錄各孔中的四個(gè)不同區(qū)域20小時(shí),觀察空白組細(xì)胞與處理組的細(xì)胞形態(tài)和光學(xué)特征變化。
結(jié)果:圖2顯示蓖麻毒素暴露后7到11小時(shí)內(nèi),Hela細(xì)胞數(shù)量逐步減少,11小時(shí)后,細(xì)胞厚度和圓形度增加,這表明細(xì)胞可能經(jīng)歷了凋亡或從板上脫落過程。同時(shí)在蓖麻毒素暴露后3至6小時(shí)內(nèi),細(xì)胞面積,不規(guī)則度和光學(xué)細(xì)胞厚度等均有顯著變化。
圖2.蓖麻毒素對Hela細(xì)胞增殖及形態(tài)的影響
參考文獻(xiàn):Efi Makdasi, Orly Laskar, Elad Milrot, et al. Whole-Cell Multiparameter Assay for Ricin and Abrin Activity-Based Digital Holographic Microscopy. 2019, 11(3).
上述兩個(gè)案例可以發(fā)現(xiàn),通過應(yīng)用Holomonitor®M4及相關(guān)軟件進(jìn)行簡單的程序設(shè)定,我們就可以持續(xù)且精確的對細(xì)胞運(yùn)動(dòng)及細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行監(jiān)測,避免繁復(fù)工作及對細(xì)胞狀態(tài)影響,輕松高效完成實(shí)驗(yàn),且數(shù)據(jù)產(chǎn)出也是相當(dāng)豐富。除此以外M4還有遷移追蹤,藥物應(yīng)答,細(xì)胞周期檢測等多種用途。
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