Countstar Rigel熒光成像法嫁接FCS軟件實現(xiàn)細胞周期、凋亡檢測研究
瀏覽次數(shù):2433 發(fā)布日期:2021-5-12
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在細胞實驗中,細胞活率、濃度、凋亡、周期等均是細胞檢測的重要部分。Countstar Rigel熒光細胞分析儀集合了定焦專利技術、高清成像系統(tǒng)、一體機、觸屏式操作、合規(guī)性等多方面優(yōu)勢,功能強大、操作便捷、重復性高深受科研工作者的喜愛。
圖1、Countstar Rigel 采用AO/PI、臺盼藍方法的準確性和穩(wěn)定性
但是大家對Countstar Rigel熒光細胞分析儀傳統(tǒng)的印象還停留在細胞計數(shù)功能上,近年來隨細胞治療技術的突飛猛進,國外De Novo公司開發(fā)的對細胞熒光圖像進行量化分析的軟件FCS,為細胞各類實驗的檢測分析提供了新的手段,同時Countstar Rigel優(yōu)異的軟硬件基礎也為拓展其新的應用搭載上了這輛順風車。
圖2、De Novo公司開發(fā)的FCS軟件
傳統(tǒng)的周期、凋亡檢測借助流式細胞儀,通過單個細胞的熒光信號轉化為脈沖電信號進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計及分析,而Countstar Rigel自身的熒光成像法嫁接上FCS軟件之后,通過細胞熒光圖像量化分析也可以得到細胞周期、凋亡的數(shù)據(jù)。相比于流式的方法這種熒光方法可以看到每個細胞的熒光成像,為我們數(shù)據(jù)的分析提供可靠的依據(jù)。
圖3、Countstar Rigel檢測細胞凋亡單個細胞熒光成像
傳統(tǒng)的流式方法雖廣為流傳,但是流式細胞儀的成本昂貴,一般是好幾個中心實驗室平臺公用一臺,然而眾多使用者造成供不應求,實驗需要根據(jù)儀器的空閑度來調節(jié),而且儀器維護成本高,需要定期用專用清洗液、鞘液等,而我們Countstar Rigel可以借助FCS解除流式的困境,同樣可以得到類似流式的數(shù)據(jù)。
圖4、Countstar Rigel 結合FCS得到的細胞周期結果
Countstar Rigel與流式細胞儀檢測細胞周期和凋亡時,可公用周期檢測試劑盒、凋亡檢測試劑盒。Countstar Rigel為周期和凋亡的數(shù)據(jù)分析提供了分析模板,采用Countstar Rigel檢測周期或凋亡后,到處FCS格式的數(shù)據(jù),導入FCS軟件內即可借助粗略的分析模板根據(jù)樣品的實際情況微調得到最終的分析結果,如圖5所示,每部分細胞具體的熒光情況均可以看到,圈門的過程中我們可以參考多種信息。
圖5、FCS分析Countstar Rigel凋亡數(shù)據(jù)結果圖
對比不同類型不同條件處理的細胞,采用Countstar Rigel檢測,結果如下圖6,可以明顯的區(qū)別各部分的占比。
圖6、FCS分析Countstar Rigel檢測不同凋亡樣本數(shù)據(jù)
試想一下,Countstar Rigel既然能得到流式類似的結果,而且原理簡單易懂,那我們日常實驗的開展豈不是又充滿歡聲笑語。