間充質(zhì)干細胞(MSC)是屬于中胚層的一類多能干細胞,最初在骨髓中被發(fā)現(xiàn),自此進入科研學(xué)者的視線。MSC來源豐富,可從骨髓、脂肪、牙髓、胎盤、臍帶、肝等許多組織中提取獲得,經(jīng)過連續(xù)多代的培養(yǎng),仍然能保持高度的增殖和分化潛能,而且免疫原性比較低,基本不存在免疫排斥反應(yīng),臨床使用中不需要配型。因具有許多得天獨厚的優(yōu)勢,MSC現(xiàn)已成為干細胞研究領(lǐng)域中的人氣明星。
但是,你知道什么樣的細胞才是MSC嗎?又該如何為MSC鑒定身份呢?其實,我們可以通過形態(tài)學(xué)鑒定,表面標(biāo)志物鑒定和多向分化潛能鑒定這三種方法來為MSC驗明正身。
01 形態(tài)學(xué)鑒定
MSC多數(shù)呈纖維細胞樣生長,在支持物表面呈梭形或不規(guī)則三角形,細胞中央有卵圓形核,胞質(zhì)向外伸出長短不同的突起。傳代后細胞呈均質(zhì)、旋渦狀排列。幾乎所有的MSC都是貼壁生長,具有較強的貼壁能力。
02 表面標(biāo)志物鑒定
MSC的細胞表面標(biāo)志物鑒定常采用流式細胞儀來進行。MSC屬混雜細胞群,其表面抗原也具有非專一性, 它可同時表達間質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞和表皮細胞的表面標(biāo)志,如粘附因子、生長因子和細胞因子受體以及整合素家族等。
MSC的細胞表面標(biāo)志物鑒定標(biāo)準為:
① CD105、CD73和CD90陽性率≥90%;
② CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79α或CD19、HLA-DR呈陰性,陽性率≤5%。
不同組織來源的MSC可共享相同的細胞表面標(biāo)記,如CD29和CD44。
03 多向分化潛能鑒定
MSC具有在體外分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肝細胞等定向分化的能力,所以鑒定MSC的多向分化潛能也是重要的鑒定方法之一。MSC成骨誘導(dǎo)分化最常用的染色方法是茜素紅染色法,成脂誘導(dǎo)分化最常用的染色方法是油紅O染色法,而成軟骨誘導(dǎo)分化最常用的方法是阿利辛藍染色、懸浮培養(yǎng)。
以上就是MSC三種常用鑒定方法,你都學(xué)會了嗎?