JC-1 試劑盒操作說明
JC-1 的試劑盒到手啦，但是該怎么操作呢？
用途：早期細胞凋亡
檢測設(shè)備：熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計或流式細胞儀
通道：FITC 通道看綠色，PI 通道看紅色
指示：紅綠熒光比例變化
a. 以 6 孔板為例，每孔加入 1mL 細胞培養(yǎng)液。
b. 陽性對照的設(shè)置：取適量 CCCP (50 mM) 恢復(fù)至室溫，陽性對照孔培養(yǎng)基中加入 1 μL，其終濃度為 50 μM，輕搖混勻，細胞培養(yǎng)箱 37℃ 孵育 5 分鐘。
c. 取適量 JC-1 (200 μM) 恢復(fù)至室溫，每孔培養(yǎng)基中加入 10 μL JC-1 (200 μM)，其終濃度為 2 μM，輕搖混勻，細胞培養(yǎng)箱 37℃ 孵育 15-20 分鐘。
e. 加入 500 μL 的 PBS (1×)，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察 (綠色熒光：Ex/Em=510/527 nm，可用 FITC 通道；紅色熒光：Ex/Em=585/590 nm，可用 PE/PI 通道)。
是不是很簡單？動動手指，分享一下，再也不用擔(dān)心師弟師妹不會用 JC-1 啦！
參考文獻
MCE JC-1 Kit 資料
規(guī)格：1T, 1 mL (100 萬細胞)用途：早期細胞凋亡
檢測設(shè)備：熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計或流式細胞儀
通道：FITC 通道看綠色，PI 通道看紅色
指示：紅綠熒光比例變化
■ 細胞染色
懸浮細胞和貼壁細胞的使用方法基本相同 (詳細說明戳 MCE 產(chǎn)品使用指南丨JC-1 使用指南)，我們以貼壁細胞為例：
注：若用熒光分光光度計或流式細胞儀檢測貼壁細胞，可先對貼壁細胞進行消化、收集，重懸后參考懸浮細胞的檢測方法。若用熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡檢測，方法如下：
a. 以 6 孔板為例，每孔加入 1mL 細胞培養(yǎng)液。
b. 陽性對照的設(shè)置：取適量 CCCP (50 mM) 恢復(fù)至室溫，陽性對照孔培養(yǎng)基中加入 1 μL，其終濃度為 50 μM，輕搖混勻，細胞培養(yǎng)箱 37℃ 孵育 5 分鐘。
c. 取適量 JC-1 (200 μM) 恢復(fù)至室溫，每孔培養(yǎng)基中加入 10 μL JC-1 (200 μM)，其終濃度為 2 μM，輕搖混勻，細胞培養(yǎng)箱 37℃ 孵育 15-20 分鐘。
d. 37ºC 孵育結(jié)束后， 吸除上清，用 PBS (1×) 洗滌 2 次。
e. 加入 500 μL 的 PBS (1×)，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察 (綠色熒光：Ex/Em=510/527 nm，可用 FITC 通道；紅色熒光：Ex/Em=585/590 nm，可用 PE/PI 通道)。
是不是很簡單？動動手指，分享一下，再也不用擔(dān)心師弟師妹不會用 JC-1 啦！
參考文獻
1. Fei Wang, et al. Urchin-like tungsten suboxide forphotoacoustic imaging-guided photothermal and photodynamic cancer combinationtherapy. New J Chem. 18 Oct 2017.
標(biāo)簽：
抑制劑
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