一抗和二抗在結(jié)合能力、用途及應(yīng)用上的區(qū)別

抗體有一抗和二抗的區(qū)別，抗體也稱免疫球蛋白是免疫系統(tǒng)響應(yīng)“外來"物質(zhì)（即微生物上存在的抗原）而產(chǎn)生的糖蛋白。每種抗體都是不相同的，它們會(huì)與其同源抗原結(jié)合并中和感染過程中微生物產(chǎn)生的毒素。抗體存在于血漿、血清、唾液和眼淚等體液中。事實(shí)上，它們約占血漿中蛋白質(zhì)的 20%。

抗體結(jié)構(gòu)
 

抗體屬于 Y 形分子，它的結(jié)構(gòu)主要是由3個(gè)部分所組成的。
 

它們總共有4條鏈：即兩條輕鏈與兩條重鏈。這些鏈的特定結(jié)構(gòu)和組合允許抗體分子同時(shí)與多個(gè)細(xì)胞結(jié)合�？贵w分子的不同部分可以結(jié)合多種抗原，也可以結(jié)合一些效應(yīng)分子。
 

抗體的可變區(qū)或V區(qū)表示/指Y結(jié)構(gòu)的兩個(gè)臂，該區(qū)域可以與抗原結(jié)合。相比之下，Y 結(jié)構(gòu)的莖被稱為恒定區(qū)或 C 區(qū)，它只能與有限數(shù)量的效應(yīng)細(xì)胞和分子結(jié)合。

一抗和二抗

經(jīng)常產(chǎn)生抗體用于研究。它們根據(jù)其結(jié)合能力和用途分為初級(jí)和次級(jí)。

可以與特定蛋白質(zhì)或感興趣的生物分子結(jié)合的抗體稱為一抗。以大鼠、小鼠、山羊和兔等動(dòng)物為宿主，以單克隆 (mAb) 或多克隆抗體 (pAb) 的形式生產(chǎn)一抗。

MAb 或 pAb 各有優(yōu)缺點(diǎn)，在選擇一抗之前需要考慮這些優(yōu)缺點(diǎn)。

MAb 由動(dòng)物的單個(gè) B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生，因此僅針對(duì)抗原的一個(gè)表位。

PAb 由動(dòng)物的多個(gè) B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生，并且具有針對(duì)抗原的幾個(gè)表位的抗體的異質(zhì)混合物。

MAb 非常適合相同的生產(chǎn)和標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)，并且產(chǎn)生的背景染色最少或不產(chǎn)生背景染色。在使用 mAb 時(shí)，與不需要的蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性也降低了。

由于 pAb 可以結(jié)合單一抗原的多個(gè)表位，因此它們能夠識(shí)別抗原中的微小變化。它們還產(chǎn)生更強(qiáng)的抗原檢測信號(hào)。因 此，它們非常適合涉及變性蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)。 

一抗和二抗的應(yīng)用
 

一抗可用于檢測糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標(biāo)志物。
 

二抗則主要用于檢測和純化抗原蛋白。
 

二抗在標(biāo)記和檢測方面比較靈敏和靈活——所以，它們?cè)诹魇郊?xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和細(xì)胞成像等一系列應(yīng)用中用于一抗的比色、化學(xué)發(fā)光和熒光檢測。
 

二抗類型的選擇基于一抗的類別：免疫球蛋白 IgG 或 IgM、標(biāo)簽類型和來源宿主。
 

由于大多數(shù)一抗是使用少數(shù)宿主物種開發(fā)的，并且大多數(shù)一抗屬于 IgG 類，因此制造商通常提供可用于許多不同檢測程序和系統(tǒng)的即用型二抗。

常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG。所選擇的二抗應(yīng)始終能夠識(shí)別產(chǎn)生一抗的宿主物種，例如，為了檢測從小鼠產(chǎn)生的一抗，使用抗小鼠二抗。

在 ELISA 和蛋白質(zhì)印跡中，標(biāo)記通常是化學(xué)發(fā)光、比色或基于熒光的，但在流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光中，僅使用熒光標(biāo)記。