凝膠法細(xì)菌內(nèi)毒素檢查干擾消除的物理方法

一、加熱滅活

對(duì)由于蛋白質(zhì)或酶的修飾而表現(xiàn)的抑制作用或?qū)е瞒c試劑變化的藥物本身是蛋白酶類(lèi)，可通過(guò)加熱滅活處理來(lái)消除干擾，或使用超過(guò)濾薄膜法去除。如將血漿1：10稀釋?zhuān)?0 ~80℃加熱5 min可破壞血漿蛋白酶抑制物，而且內(nèi)毒素沒(méi)有明顯的損失，另外還可將血清樣品在沸水中加熱2~3 min再稀釋至少10倍。
 

二、樣品稀釋
王欣放等^[1]采用不同廠家的鱟試劑對(duì)不同廠家的3批注射用對(duì)氨基水楊酸鈉分別進(jìn)行干擾試驗(yàn)。結(jié)果，將樣品稀釋至7.5 mg/ml以下時(shí)可消除干擾作用，使用靈敏度為0.125 EU/ml的鱟試劑進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢查時(shí)結(jié)果均符合規(guī)定。

王超華等^[2]對(duì)大蒜注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的結(jié)果表明，將供試品10倍稀釋后可消除干擾。

吳文飛^[3]對(duì)3種無(wú)菌沖洗劑細(xì)菌內(nèi)毒素的檢查方法進(jìn)行了探討，其中硫酸新霉素滅菌溶液在pH 3.2~3.8時(shí)，4倍稀釋后無(wú)干擾。

應(yīng)注意，有些樣品如碳酸氫鈉注射液因堿性較強(qiáng)且主要成分碳酸氫鈉含量較高，因此單純稀釋是不能排除干擾的，必須經(jīng)過(guò)調(diào)節(jié)藥品的pH處理后再稀釋?zhuān)�才能排除干擾^[4]。
 

三、容器材質(zhì)選用
內(nèi)毒素稀釋管應(yīng)該是高質(zhì)量硼硅酸鹽玻璃材質(zhì)，以避免內(nèi)毒素吸附于試管壁。不可使用塑料用具，因其伴隨很多未知的干擾因素。同時(shí)避免使用聚丙烯試管，因?yàn)橛删郾�烯材料制成的窗口�?duì)內(nèi)毒素的吸附也被公認(rèn)為是干擾內(nèi)毒素檢查方法的因素之一。因此，任何聚丙烯材料的試驗(yàn)器材不可用于試驗(yàn)中，但有實(shí)驗(yàn)證明由聚丙烯材料制成的加樣頭，與實(shí)驗(yàn)溶液的短暫接觸對(duì)內(nèi)毒素的回收沒(méi)有影響。

參考文獻(xiàn)：
[1] 王欣放.注射用對(duì)氨基水楊酸鈉的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法[J]．中國(guó)藥業(yè),2008,17(6):38-39
[2] 王超華.大蒜注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的探討[J]．西北藥學(xué)雜志，2007,22 (2):75
[3] 吳文飛.3種無(wú)菌沖洗劑細(xì)菌內(nèi)毒索檢查方法初探[J].中國(guó)藥房,2007,18 (16)；1262-1264
[4] 徐富墻,李萬(wàn)玉,趙語(yǔ).碳酸氫鈉注射液進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒索檢查的研究[J].中國(guó)藥房,2000,ll(2)：65-67

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