細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室預(yù)防污染的幾個小技巧

在我們進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時，最重要的是杜絕一切可能的污染源，如果造成污染，實(shí)驗(yàn)結(jié)果就會出現(xiàn)偏差，所以必須重新檢測，這一套流程下來即浪費(fèi)工作時間，又增加了實(shí)驗(yàn)成本。而且以污染細(xì)胞和未污染細(xì)胞為基礎(chǔ)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時，有可能得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會截然不同。所以如何預(yù)防污染的發(fā)生是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室最重要的一項(xiàng)工作。

如果實(shí)驗(yàn)室引入一種新的細(xì)胞系，或者一直培養(yǎng)保存的細(xì)胞系，但對該細(xì)胞系從未鑒定或檢測過，就有可能給實(shí)驗(yàn)室?guī)�來污染。因此使用前�?yīng)先鑒定新引入細(xì)胞系，或檢測保存的細(xì)胞系是否無污染。

細(xì)胞系STR分析已被權(quán)威機(jī)構(gòu)作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞鑒定

對于培養(yǎng)基等試劑的選擇，必須在符合GMP/GLP規(guī)定的廠房生產(chǎn)，并且需要對血清進(jìn)行常規(guī)污染檢測，以及建立良好的分裝習(xí)慣和體系。

所有分裝使用或備用的試劑（如血清、胰酶）都應(yīng)該去記錄批次號，并且要保證實(shí)驗(yàn)室干凈、衛(wèi)生，實(shí)驗(yàn)的設(shè)備是無菌的、以及操作環(huán)節(jié)無誤，這些做好了都可避免污染的發(fā)生。所以必須遵照嚴(yán)格的無菌操作規(guī)范和管理。

遵照嚴(yán)格的無菌操作規(guī)范和管理步驟：

1)利用合適的工具進(jìn)行移液操作

如果移液操作過程誤操作，那么分裝樣品有可能存在污染。因此選擇合適的移液器和高品質(zhì)耗材，是確保分裝樣品潔凈的保證。跟實(shí)驗(yàn)室常用的雙按鈕移液器相比，單按鈕移液器能更好的減少氣溶膠污染，因?yàn)閱伟粹o移液器打出吸頭時活塞無需回彈，而且直接按下去。

2)「具有生物安全柜功能」的濾芯吸頭

移液操作中除移液器外，還可通過使用濾芯吸頭來降低氣溶膠污染。優(yōu)先選用雙濾芯吸頭，它具有兩層濾芯和不同孔徑，確保超高的阻隔效率。其濾芯性能符合EN1822標(biāo)準(zhǔn)(空氣過濾的級別)，具有HEPAE12級的過濾性能。

3)用培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞，特別是透氣蓋培養(yǎng)瓶

相比培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板，培養(yǎng)瓶只有瓶口可以與外界聯(lián)通，因此減少外界氣體及微生物與培養(yǎng)細(xì)胞接觸，減少污染的幾率。具有濾膜的透氣瓶蓋，可更加有效的防止細(xì)菌、病毒，以及支原體等的污染。

4)水浴設(shè)備必須做好清潔和維護(hù)

水也是主要污染源之一，所以在我們使用水浴設(shè)備進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇時，一定要注意防止細(xì)菌或霉菌的污染，相關(guān)設(shè)備要帶蓋，每周徹底清潔，水浴中可添加抑菌劑限制細(xì)菌增殖，錐形瓶/樣品管等從水浴中取出后，需進(jìn)行有效消毒。相較而言，金屬浴可提供無污染的溫控條件。