基于質(zhì)譜法實現(xiàn)多個單克隆抗體藥物同時監(jiān)測

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本期內(nèi)容：
上海中科新生命生物科技有限公司發(fā)布國內(nèi)首個LC-MS/MS單克隆抗體藥物濃度聯(lián)檢一類試劑盒
 
 
上海中科新生命生物科技有限公司獲批上市首個多種單克隆抗體聯(lián)檢試劑盒（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法），該產(chǎn)品首次實現(xiàn)同時快速、高效、準(zhǔn)確的監(jiān)測單種或多種單克隆抗體藥物的濃度，如貝伐珠、曲妥珠、利妥昔和特瑞普利等。
 
 
 
單克隆抗體藥物介紹

1986年，美國FDA批準(zhǔn)上市了第一個單克隆抗體藥物muromonab-CD3（OKT3），開啟了藥物治療的新征程，標(biāo)志著單克隆抗體藥物 （Monoclonal Antibody、mAb）治療時代來臨。經(jīng)過30多年的研究與發(fā)展，單克隆抗體藥物經(jīng)歷了四個階段（圖2），隨著單克隆抗體的人源化程度提升，人體對藥物的排斥反應(yīng)逐漸降低，藥物療效得到更好的發(fā)揮。
   
單克隆抗體藥物以其高度靶向性和療效確切的特點，通過特異性識別并與藥物靶點結(jié)合，達到治療疾病作用或調(diào)節(jié)生理功能作用，在腫瘤、自身免疫、心血管和神經(jīng)性疾病、病毒感染等疾病領(lǐng)域顯示出獨特的優(yōu)勢和廣闊的應(yīng)用前景。單克隆抗體藥物的熱門靶點包括實體瘤靶向治療中的HER2、EGFR、VEGF/VEGFR等，血液腫瘤靶向治療中的CD19、CD20、CD30、CD38等，免疫治療靶向治療中的PD-1/PD-L1、CTLA-4等，自身免疫性疾病靶向治療中的TNF類、白細胞介素類等。
 
單克隆抗體藥物在全球生物制藥領(lǐng)域增長迅速，自1986年第一個單克隆抗體藥物（單抗藥物）上市以來，全球已有超過100種單抗藥物獲批上市。根據(jù)各制藥公司2021年財報披露的藥品銷售數(shù)據(jù)，2021年全球銷售收入合計4520億美元；從藥物類型上看，TOP100藥品中單抗藥物共32個，銷售收入占比34%，包括阿達木單抗、帕妥珠單抗、英夫利昔單抗、貝伐珠單抗、戈利木單抗、曲妥珠單抗、利妥昔單抗等。
 
 
單克隆抗體藥物濃度監(jiān)測的重要意義

mAbs的藥代動力學(xué)（PK）和藥效動力學(xué)（PD）過程非常復(fù)雜，具有非線性動力學(xué)特征、個體暴露差異大、以非特異性途徑消除、特異性靶標(biāo)介導(dǎo)以及藥物處置個體差異大等。因此，需要對 mAbs 進 行 治 療 藥 物 監(jiān) 測（Therapeutic drugmonitoring，TDM），通過測定患者體內(nèi)的藥物暴露、藥理標(biāo)志物或藥效指標(biāo)，實施個體化精準(zhǔn)用藥治療。
   
2018年《中國炎癥性腸病治療藥物監(jiān)測專家共識意見》推薦在炎癥性腸病治療過程中對抗腫瘤壞死因子（Tumor necrosis factor，TNF）-α制劑進行TDM，并根據(jù)TDM結(jié)果調(diào)整治療決策（圖3），目前臨床使用的抗TNF-α生物制劑主要有英夫利昔單抗和阿達木單抗[1]。2020年《抗腫瘤生物類似藥治療藥物監(jiān)測學(xué)專家共識》指出有必要通過監(jiān)測藥物暴露進行個體化調(diào)整生物類似藥的劑量，并根據(jù)血藥濃度調(diào)整生物類似藥劑量，進一步推薦建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS法）和免疫測定方法檢測血藥濃度，生物類似藥包括但不限于貝伐珠單抗、利妥昔單抗和曲妥珠單抗等[2]。
 
 
單克隆抗體生物分析方法

mAbs 主要生物分析方法包括：酶聯(lián)免疫法和LC-MS/MS 法，其中酶聯(lián)免疫法操作簡單快速、可用于高通量分析，但其存在定量范圍較窄（約2個數(shù)量級）、方法開發(fā)時間長、存在交叉反應(yīng)、非特異性結(jié)合、專屬性差、僅可測定單抗藥物的游離形式等缺點，限制了其應(yīng)用[3]。近年來，LC-MS/MS 法在大分子藥物領(lǐng)域的應(yīng)用引起了廣泛的關(guān)注，與傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫法相比，其定量范圍更寬（3~5個數(shù)量級）、選擇性高、方法開發(fā)時間短、結(jié)果更加精準(zhǔn)可靠。然而，LC-MS/MS 法目前主要用于小分子藥物的精準(zhǔn)定量，mAbs相對分子質(zhì)量約100~150 kD，因此LC-MS/MS 法定量分析 mAbs 主要通過“自下而上”（bottom-up approach）分析，即把mAbs酶解成更小的肽，然后選取一個或多個特征肽進行 LC-MS/MS法分析，檢測靈敏度高，選擇性好，應(yīng)用廣泛（圖4）[3]。
   
 
LC-MS/MS法同時檢測多種單克隆抗體藥物濃度

上海中科新生命生物科技有限公司依托其雄厚的質(zhì)譜技術(shù)優(yōu)勢和研究開發(fā)實力，成功開發(fā)了基于高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜平臺監(jiān)測單克隆抗體藥物濃度的試劑盒產(chǎn)品，該產(chǎn)品不僅是國內(nèi)首個獲批上市的多種單克隆抗體聯(lián)檢試劑盒（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）產(chǎn)品，同時也是國內(nèi)首個前處理時長僅需2.5小時內(nèi)的大分子質(zhì)譜檢測試劑盒產(chǎn)品，可實現(xiàn)同時快速、高效、準(zhǔn)確的分析貝伐珠、曲妥珠、利妥昔和特瑞普利等多種單克隆抗體藥物濃度。本產(chǎn)品一次進樣僅需6min，同時完成多種單克隆抗體藥物的精準(zhǔn)分析（圖5），可以有效避免結(jié)構(gòu)類似物或抗藥抗體的干擾，具有靈敏度高、特異性高、線性范圍寬、樣本用量少的優(yōu)勢和特點，有效節(jié)省人力物力，提高通量，用于更加高效準(zhǔn)確地進行單克隆抗體藥物療效監(jiān)測，對推動我國單克隆抗體藥物濃度監(jiān)測的臨床應(yīng)用具有里程碑意義。
   
 
參考文獻✦
[1] 中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病學(xué)組. 中國炎癥性腸病治療藥物監(jiān)測專家共識意見
[J] . 中華炎性腸病雜志，2018，2 (4): 253-259.
[2] 中國藥理學(xué)會，中日友好醫(yī)院. 《抗腫瘤生物類似藥治療藥物監(jiān)測藥學(xué)專家共識(2020版)》
[J] . 中國醫(yī)院用藥評價與分，2020，20 (5) : 513-518.
[3] 夏 穎，郭宏麗，胡雅慧，陳 峰. 治療性單克隆抗體的藥物監(jiān)測：LC-MS/MS技術(shù)的應(yīng)用進展
[J] . Journal of China Pharmaceutical University，2021，52 (1) :122 -128.
 
 
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文末寄語
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