內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌外膜的組成部分,它們的檢測在制藥和醫(yī)療行業(yè)對產(chǎn)品質(zhì)量和安全至關(guān)重要。流行的檢測內(nèi)毒素的方法是各種鱟變形細(xì)胞裂解物 (LAL) 測定。由于這個(gè)方法涉及使用鱟血液中的變形細(xì)胞,所以此方法的長期可行性值得懷疑。PyroGene方法,基于重組因子 C(rFC) 消除了對鱟血的需要。PyroGene使用熒光法檢測內(nèi)毒素,熒光法較傳統(tǒng)方法更靈敏,特異性更強(qiáng)。
近日,德國BMG LABTECH公司發(fā)布新的應(yīng)用,使用新一代多功能酶標(biāo)儀CLARIOstar Plus 快速檢測內(nèi)毒素的方法。檢測以動(dòng)態(tài)方式收集數(shù)據(jù)并使用增強(qiáng)的動(dòng)態(tài)范圍(EDR),與標(biāo)準(zhǔn)的PyroGene 熒光檢測程序相比,可以將檢測時(shí)間縮短到15分鐘。
CLARIOstar Plus具有增強(qiáng)的動(dòng)態(tài)范圍 (EDR) 能力。通過EDR技術(shù),實(shí)驗(yàn)人員無需通過手動(dòng)設(shè)置gain值來調(diào)節(jié)儀器檢測的靈敏度,可以在同一塊檢測板上同時(shí)檢測到非常高和非常低的信號,既保證高的檢測靈敏度,又保證了大的檢測動(dòng)態(tài)范圍,并且可將標(biāo)準(zhǔn)的60分鐘檢測時(shí)間加快到15分鐘完成。
圖1. 在同一塊板上使用EDR檢測從0.005-20IU/ml的標(biāo)準(zhǔn)品
圖2. 圖1中最低的2個(gè)濃度也有明顯的信號變化
圖3. 在15min(藍(lán)色)、 20min(綠色) 、60min(紅色)濃度反應(yīng)線性擬合,R2達(dá)到1
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