基于熒光的檢測(cè)方法在生命科學(xué)研究中應(yīng)用廣泛。市面上有多種試劑盒和試劑可用于熒光酶標(biāo)儀所涵蓋的各種檢測(cè)類型。
常見(jiàn)熒光檢測(cè)應(yīng)用包括DNA/RNA定量、鈣測(cè)定、酶活性、基因表達(dá)、GPCR的第二信使信號(hào)、細(xì)胞凋亡測(cè)定、細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞毒性等。
如果您正在選購(gòu)一臺(tái)熒光酶標(biāo)儀,各種規(guī)格、選項(xiàng)和功能也許會(huì)讓您挑花了眼。為此,我們總結(jié)了7個(gè)最重要的關(guān)注點(diǎn),讓我們?yōu)槟灰坏纴?lái)。
1/靈敏度
毋庸置疑,靈敏度更高的酶標(biāo)儀能夠提供更好的數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果,重復(fù)樣本之間的差異更小,有反應(yīng)和無(wú)反應(yīng)樣本之間的距離(assay window)更大。更高的靈敏度還有助于減少試劑和樣品的用量,使檢測(cè)更加精簡(jiǎn)的同時(shí),生成高質(zhì)量的結(jié)果。這將有效降低每個(gè)樣品的檢測(cè)成本(圖 1)。
圖1:PHERAstar® FSX 是市面上靈敏度較高的酶標(biāo)儀。
2/動(dòng)態(tài)范圍
在熒光強(qiáng)度檢測(cè)中,樣品的濃度范圍通常較大。在熒光酶標(biāo)儀上測(cè)量的信號(hào)可能會(huì)跨越從極弱到極強(qiáng)的范圍。還有,基于酶或細(xì)胞動(dòng)力學(xué)檢測(cè)的樣品通常很難預(yù)測(cè)其信號(hào)強(qiáng)度,因?yàn)樵趧?dòng)力學(xué)檢測(cè)過(guò)程中,最大信號(hào)會(huì)隨著時(shí)間而累積。
在這些情況下,可能很難在一次測(cè)量中用一種設(shè)置獲取所有樣品的信號(hào)。信號(hào)強(qiáng)度高的樣品可能會(huì)使酶標(biāo)儀的熒光檢測(cè)器飽和;信號(hào)強(qiáng)度低的樣品可能無(wú)法與空白樣品區(qū)分開(kāi)來(lái)。
如果熒光酶標(biāo)儀支持較大的動(dòng)態(tài)范圍,可在單次運(yùn)行中讀取差異很大的樣品,避免試出正確的稀釋倍數(shù)和熒光增益比率所造成的試劑和時(shí)間浪費(fèi)。BMG LABTECH的 CLARIOstar® Plus和VANTAstar® 酶標(biāo)儀配備的動(dòng)態(tài)范圍擴(kuò)展技術(shù)(EDR)提供具有競(jìng)爭(zhēng)力的動(dòng)態(tài)范圍(8個(gè)數(shù)量級(jí)濃度),可在單次運(yùn)行中自動(dòng)測(cè)量極弱和極強(qiáng)的信號(hào),無(wú)需進(jìn)行調(diào)節(jié)(圖 2)。
圖2:通過(guò)EDR和3種不同增益設(shè)置得出的標(biāo)準(zhǔn)稀釋曲線。EDR支持在單次運(yùn)行中檢測(cè)信號(hào)極強(qiáng)和極弱的樣品,無(wú)需手動(dòng)設(shè)置。
3/波長(zhǎng)選擇
激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)是任何熒光檢測(cè)的必要參數(shù)。選擇合適的波長(zhǎng)可降低通常由樣品和微孔板的光散射或自發(fā)熒光引起的非特異性背景或干擾。
圖3:BMG LABTECH專利的LVF光柵使用線性可變?yōu)V光片來(lái)選擇不同波長(zhǎng)和帶寬的光。
4/兼容的微孔板規(guī)格
在生命科學(xué)研究中,進(jìn)行基礎(chǔ)的熒光測(cè)定一般使用黑色96孔微孔板。但如果您有多種樣品,并希望節(jié)約寶貴的試劑或時(shí)間,也可以使用384孔和1536孔板。只需確保您選擇的熒光酶標(biāo)儀也能兼容您計(jì)劃使用的微孔板規(guī)格。還有一點(diǎn),吸光、熒光和化學(xué)發(fā)光檢測(cè)需要不同顏色的微孔板,分別為透明、黑色和白色(圖 4)。
圖4:幾種不同顏色的微孔板
5/試劑注入裝置
在選購(gòu)熒光酶標(biāo)儀時(shí),還應(yīng)考慮分析應(yīng)用的性質(zhì)。對(duì)于酶動(dòng)力學(xué)檢測(cè)或基于細(xì)胞實(shí)時(shí)反應(yīng)的檢測(cè),試劑注入器能派上大用場(chǎng)。手動(dòng)將試劑移入孔中有可能導(dǎo)致反應(yīng)的重要數(shù)據(jù)丟失。特別是對(duì)于一些快速反應(yīng),可能還沒(méi)來(lái)得及檢測(cè),您所尋找的信號(hào)就已經(jīng)消失了。我們的熒光酶標(biāo)儀配備了試劑注入器,注射和信號(hào)檢測(cè)同時(shí)在一個(gè)孔中進(jìn)行,然后在下一個(gè)孔繼續(xù)進(jìn)行(圖 5)。這樣一來(lái),即使是快速反應(yīng),您也不會(huì)錯(cuò)過(guò)任何數(shù)據(jù)點(diǎn)。
圖5:BMG LABTECH酶標(biāo)儀配備的試劑注入器能夠按設(shè)定的注射速度和注射量進(jìn)行試劑輸送。
6/環(huán)境控制
如果您需要進(jìn)行基于活細(xì)胞的測(cè)定,又想避免在熒光酶標(biāo)儀和培養(yǎng)箱之間來(lái)回移動(dòng)微孔板,請(qǐng)確保您選擇的酶標(biāo)儀具有控制其內(nèi)部氣體環(huán)境和溫度的功能。
BMG LABTECH酶標(biāo)儀可集成大氣控制單元(ACU,圖 6)。ACU可獨(dú)立調(diào)節(jié)酶標(biāo)儀倉(cāng)內(nèi)的氧氣和二氧化碳含量,為活細(xì)胞檢測(cè)應(yīng)用提供理想的環(huán)境。與振蕩和恒溫孵育功能相結(jié)合,ACU為基于細(xì)胞的檢測(cè)(從標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)到缺氧檢測(cè)等)提供了真正不用操心的“甩手”解決方案。
圖6:ACU可獨(dú)立調(diào)節(jié)酶標(biāo)儀內(nèi)部的氧氣和二氧化碳,為基于細(xì)胞的檢測(cè)應(yīng)用提供理想的環(huán)境。
7/數(shù)據(jù)分析軟件
酶標(biāo)儀的軟件是容易被低估的選購(gòu)要點(diǎn)。有些酶標(biāo)儀軟件只能控制測(cè)定過(guò)程并提供原始檢測(cè)數(shù)據(jù)輸出,也有些軟件可以進(jìn)行復(fù)雜的分析。
一款全面、易用、靈活的軟件是您的得力助手,可簡(jiǎn)化檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析過(guò)程,使儀器發(fā)揮應(yīng)有的作用。
熒光檢測(cè)中最實(shí)用的計(jì)算功能包括自動(dòng)扣除空白,以及根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線自動(dòng)計(jì)算濃度、Km和Vmax等酶常數(shù)。
對(duì)于常見(jiàn)的測(cè)定應(yīng)用,BMG LABTECH軟件包提供預(yù)設(shè)的快速測(cè)定專用方案和專用分析模板。通過(guò)這些專用解決方案,只需單擊鼠標(biāo)即可采集和分析數(shù)據(jù),使研究人員能夠快速、輕松地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(圖 7)。
圖7:BMG LABTECH軟件界面
為何選擇BMG LABTECH熒光酶標(biāo)儀?
BMG LABTECH專注于制造高質(zhì)量的酶標(biāo)儀,在微孔板讀板技術(shù)領(lǐng)域擁有30多年的豐富經(jīng)驗(yàn)。這些知識(shí)體現(xiàn)在我們的儀器所提供的結(jié)果中——這是實(shí)驗(yàn)的決定性因素!BMG LABTECH的靈敏度、速度和靈活性值得信賴。我們研發(fā)的多功能酶標(biāo)儀可在數(shù)年內(nèi)維持優(yōu)異性能。所有儀器都是在德國(guó)研發(fā)、生產(chǎn)和測(cè)試,質(zhì)量堅(jiān)固可靠。
按需選擇功能
我們的熒光酶標(biāo)儀采用模塊化設(shè)計(jì),可配備不同的檢測(cè)模式,涵蓋更多應(yīng)用。即使您沒(méi)有一開(kāi)始就選配酶標(biāo)儀的全部功能,也有升級(jí)擴(kuò)展的空間。
全方位的服務(wù)和支持
我們致力于為您提供最-好的客戶服務(wù)。所有銷售區(qū)域的代表都是訓(xùn)練有素的技術(shù)專家,能夠?yàn)橛布④浖痛蠖鄶?shù)應(yīng)用問(wèn)題提供支持。對(duì)于復(fù)雜的應(yīng)用解決方案,我們也有相應(yīng)的專家團(tuán)隊(duì)為您排憂解難。
多用戶軟件包
我們的所有儀器都配有多用戶軟件包,可根據(jù)用戶需要安裝在多臺(tái)計(jì)算機(jī)上,無(wú)需購(gòu)買(mǎi)額外的許可。我們的酶標(biāo)儀在購(gòu)買(mǎi)后的12個(gè)月內(nèi)免費(fèi)提供軟件更新。
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