熒光素酶報(bào)告基因助力GLP-1RA藥物活性檢測(cè)的應(yīng)用原理及步驟

熒光素酶報(bào)告基因在檢測(cè)GLP-1RA（胰高血糖素樣肽-1受體激動(dòng)劑）藥物活性中起到了關(guān)鍵作用。以下是其應(yīng)用原理：

首先，熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)是以熒光素（luciferin）為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)熒光素酶（firefly luciferase）活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。當(dāng)熒光素酶與熒光素底物反應(yīng)時(shí)，會(huì)發(fā)出生物熒光，這種熒光信號(hào)的強(qiáng)度與熒光素酶的活性成正比。
 

在GLP-1RA藥物活性檢測(cè)中，熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)通常與GLP-1受體（GLP-1R）的報(bào)告基因質(zhì)粒結(jié)合使用。這種質(zhì)粒包含了與GLP-1R基因表達(dá)相關(guān)的啟動(dòng)子序列，使得當(dāng)GLP-1R被激活時(shí)，可以驅(qū)動(dòng)熒光素酶基因的表達(dá)。
 

具體檢測(cè)步驟如下：

1，將GLP-1R的報(bào)告基因質(zhì)粒與熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染到適當(dāng)?shù)募?xì)胞系中，如293細(xì)胞。

2，將待測(cè)的GLP-1RA藥物添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中，使其與細(xì)胞上的GLP-1R結(jié)合并激活。

3，如果GLP-1RA藥物能夠成功激活GLP-1R，那么與GLP-1R基因表達(dá)相關(guān)的啟動(dòng)子序列就會(huì)被激活，進(jìn)而驅(qū)動(dòng)熒光素酶基因的表達(dá)。

4，通過(guò)添加熒光素底物并測(cè)量產(chǎn)生的熒光信號(hào)強(qiáng)度，可以評(píng)估GLP-1RA藥物的活性。熒光信號(hào)的強(qiáng)度反映了熒光素酶的活性，進(jìn)而反映了GLP-1R的激活程度。

這種方法具有高靈敏度、高特異性和操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，使得研究人員能夠更準(zhǔn)確地評(píng)估GLP-1RA藥物的活性和藥效。熒光素酶報(bào)告基因在檢測(cè)GLP-1RA藥物活性中發(fā)揮著重要作用，為藥物研發(fā)和藥效評(píng)估提供了有力的工具。
 

CHASELECTION逐典螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒旨在準(zhǔn)確、靈敏、高效地測(cè)定螢火蟲(chóng)螢光素酶活性，應(yīng)用高通量藥物篩選、藥物活性檢測(cè)、大規(guī)模啟動(dòng)子功能測(cè)定、信號(hào)通路等研究。

逐典螢光素酶報(bào)告基因

針對(duì)報(bào)告基因檢測(cè)不同的側(cè)重需求，逐典推出了3種檢測(cè)系統(tǒng)。

逐典螢光素酶報(bào)告基因優(yōu)勢(shì)：

1. 檢測(cè)靈敏度高，信號(hào)穩(wěn)定性好

HEK293-NFK B-LUC細(xì)胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時(shí)后,分別用增強(qiáng)型、超敏型、穩(wěn)定型檢測(cè)試劑進(jìn)行信號(hào)檢測(cè)。

2. 操作方便

僅需將底物和螢光素酶檢測(cè)緩沖液混合后直接加入到細(xì)胞即可。

3. 穩(wěn)定性好

同時(shí)在10次反復(fù)凍融實(shí)驗(yàn)中，逐典全系列報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒顯示出較強(qiáng)的穩(wěn)定性。