一、實驗基礎(chǔ)原理
懸尾實驗(TST)作為一種快速且有效的實驗方法,被廣泛用于評估抗抑郁藥物、興奮藥物及鎮(zhèn)靜藥物的藥效。其基本原理在于模擬小鼠懸尾后無法逃脫的情境,進而促使小鼠進入一種被稱為“抑郁不動狀態(tài)”的特定行為模式。這種狀態(tài)下,小鼠的掙扎行為逐漸減少并最終放棄,不動時間的長度被用作衡量抑郁狀態(tài)的指標(biāo)?挂钟羲幬锖团d奮藥物通常能夠顯著減少小鼠的不動時間,從而反映出其藥效。
在實驗中,小鼠的尾部被固定,使其頭部朝下懸掛。小鼠會嘗試掙扎以擺脫這種不適狀態(tài),但在多次嘗試無果后,它們會表現(xiàn)出間斷性的不動行為,這反映了小鼠的“行為絕望”狀態(tài)。記錄和分析小鼠的這種不動行為狀態(tài),有助于我們理解和評估不同藥物對抗抑郁和興奮作用的效果。
二、實驗步驟與注意事項
1.動物選擇:不建議使用體重較重的大鼠,因為它們需要依賴尾巴支撐體重,這可能對其造成不適。
2.適應(yīng)期:將動物從日常環(huán)境轉(zhuǎn)移到實驗環(huán)境時,應(yīng)給予至少一小時的適應(yīng)時間。
3.環(huán)境控制:確保實驗環(huán)境安靜,避免突然的噪音干擾,以減少小鼠的應(yīng)激反應(yīng)。
4.視頻錄制:使用專業(yè)軟件或設(shè)備錄制實驗過程,確保背景對比度最佳(如白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景)。
5.衛(wèi)生措施:底部可設(shè)置可拆卸的拖盤,方便收集和處理實驗過程中產(chǎn)生的糞便和尿液。
6.膠帶使用:確保使用的膠帶牢固且能承受小鼠的重量,避免在實驗過程中脫落或斷裂。
7.尾巴攀爬阻止:為防止小鼠攀爬尾巴,可使用一段塑料管套在其尾巴上,以防止此類行為干擾實驗結(jié)果。
8.行為判斷:在分析時,僅當(dāng)前肢活動而無后肢參與的小動作或慣性擺動,均被視為不動狀態(tài)。
9.實驗后處理:實驗結(jié)束后,輕輕將膠帶從小鼠尾巴上取下,避免撕扯造成不必要的痛苦。
10.清潔工作:每次實驗結(jié)束后,徹底清潔實驗設(shè)備,包括收集和處理糞便、尿液等廢棄物。