固相萃取SPE的簡(jiǎn)介、優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用場(chǎng)景的介紹

分析的穩(wěn)定性可能不足，因?yàn)槿魏渭?xì)微變化都可能影響一對(duì)關(guān)鍵分析物的分離度。

另一個(gè)考慮因素是，原始樣品基質(zhì)中存在的所有干擾物都有可能導(dǎo)致儀器停機(jī)，因?yàn)槊看芜M(jìn)樣都會(huì)積聚污染。如果在樣品前處理過(guò)程中去除了干擾物，則可以使用更簡(jiǎn)單、更穩(wěn)定的方法來(lái)分析目標(biāo)化合物。如圖3所示，圖中比較了原始樣品（上圖）與使用SPE方法制備的新樣品（下圖）。
 

簡(jiǎn)化樣品基質(zhì)的另一個(gè)優(yōu)勢(shì)是提高了定量準(zhǔn)確度。圖4中化合物1的頂部藍(lán)色跡線起初看起來(lái)可以接受。但與正下方紅色的空白樣品基質(zhì)跡線相比，它實(shí)際受到了來(lái)自樣品基質(zhì)的一些污染。經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)腟PE方案處理后，下方跡線顯示了不存在干擾問(wèn)題的同一化合物，使定量更加準(zhǔn)確。
 

另一個(gè)示例如圖5所示。上方跡線顯示，樣品基質(zhì)對(duì)化合物1和2均存在顯著干擾。下方跡線顯示，由于使用SPE進(jìn)行了適當(dāng)?shù)臉悠非疤幚恚�結(jié)果得到大幅改善[干凈的基線]。請(qǐng)注意，更干凈的基線有助于提高分析結(jié)果準(zhǔn)確度。此外，如果樣品需要對(duì)該化合物進(jìn)行分離和純化，則可以獲得更純凈的提取物。
 

2. 減弱MS應(yīng)用中的離子抑制效應(yīng)或離子增強(qiáng)效應(yīng)
復(fù)雜樣品基質(zhì)帶來(lái)的第二個(gè)問(wèn)題體現(xiàn)在質(zhì)譜儀輸出[LC-MS或LC/MS/MS]上。為獲得適當(dāng)?shù)腗S信號(hào)響應(yīng)[靈敏度]，必須形成合適的化合物離子。如果化合物離子的形成受到樣品基質(zhì)中干擾物的抑制，信號(hào)強(qiáng)度將大幅下降。

可以在圖6中看到這種效應(yīng)。上圖是注入用生理鹽水制備的目標(biāo)化合物溶液的信號(hào)。下方跡線顯示，當(dāng)分析人血漿中所含的這些相同化合物時(shí)，信號(hào)響應(yīng)顯著下降[抑制率 > 90%]。對(duì)于下方跡線，僅執(zhí)行了常規(guī)蛋白沉淀步驟。該技術(shù)無(wú)法清除引起離子抑制的基質(zhì)干擾物，導(dǎo)致信號(hào)響應(yīng)不佳。
 

這種抑制效應(yīng)另一個(gè)很好的示例可參見(jiàn)圖7。在MS輸出的上方跡線中，血漿樣品只經(jīng)過(guò)蛋白沉淀步驟處理，可以看出特非那定峰受到80%的抑制。在下方跡線中，同樣的樣品使用SPE方法進(jìn)行了處理，可以看出離子抑制效應(yīng)非常小。由于去除了樣品基質(zhì)中的干擾物，因此能夠形成合適的化合物離子，從而獲得更出色的信號(hào)。
 

有時(shí)，樣品基質(zhì)中的干擾物會(huì)人為增加化合物信號(hào)的報(bào)告值。這種現(xiàn)象稱為離子增強(qiáng)效應(yīng)，會(huì)導(dǎo)致誤報(bào)偏高的信號(hào)值。適當(dāng)?shù)腟PE方法可以清除化合物中的干擾物，盡可能減弱該效應(yīng)，從而得到更準(zhǔn)確的報(bào)告值。

3. 按類別分餾樣品基質(zhì)以分析化合物的能力
分析人員要處理的樣品可能包含許多化合物，需要按不同類別分離這些化合物，以便更有效地完成進(jìn)一步分析。例如，軟飲料的配方中包含多種化合物。可以開(kāi)發(fā)一種SPE方法來(lái)分離不同類別的化合物，例如按極性分離。極性化合物與較為非極性的化合物可以作為分離餾分收集，然后就能以更有效的方式分別分析這兩種餾分，因?yàn)樗鼈兊幕�合物相似度較高。

圖8的示例說(shuō)明了SPE的分餾能力。在這里，一種復(fù)雜的干粉樣品[紫葡萄飲料混合物]輕松分離成四種餾分：一個(gè)僅含極性化合物的餾分、一個(gè)純化的紅色化合物、一個(gè)純化的藍(lán)色化合物，最后一個(gè)餾分包含所有剩余的非極性極強(qiáng)的化合物。本書其他地方會(huì)介紹這種能力的強(qiáng)大之處。
 

4. 痕量目標(biāo)物的濃縮（富集）
如今，分析人員經(jīng)常需要報(bào)告濃度水平遠(yuǎn)低于以往的化合物，可能低至萬(wàn)億分之一[ppt]甚至更低。在純樣品中，這些濃度通常低于分析儀器的靈敏度。

分析環(huán)境樣品中的痕量污染物或生物體液中隨時(shí)間推移形成的代謝物就是一個(gè)很好的例子。圖9中的上方跡線顯示，原始純樣品中目標(biāo)化合物的信號(hào)響應(yīng)不佳。上方跡線使用相同的分析條件，但樣品是通過(guò)痕量濃縮策略中所用的SPE方法制備的，可以看到該化合物的信號(hào)強(qiáng)度明顯增加。利用這個(gè)結(jié)果，即可準(zhǔn)確計(jì)算出純樣品中的原始化合物濃度。
 

如果沒(méi)有SPE中色譜填料的保留能力，使用其他樣品前處理方法就算可行，也很難對(duì)特定化合物進(jìn)行痕量濃縮。

總結(jié)
正如我們所看到的，帶有色譜床的SPE裝置可以執(zhí)行四項(xiàng)關(guān)鍵功能，從而提高樣品分析的成功率。請(qǐng)參見(jiàn)圖10