JQ1抑制劑-MCE(MedChemExpress)
(+)-JQ-1 (JQ1) 是一種有效特異性的可逆 BET bromodomain 抑制劑，抑制 BRD4(1/2) 的 IC50 分別為 77 nM 和 33 nM。(+)-JQ-1 激活自噬 (autophagy)
MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報(bào)，我們不為任何個(gè)人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)
我們將采用定制合成服務(wù)的方式為您快速提供所需產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)
生物活性
體外研究
(+)-JQ-1 代表溴結(jié)構(gòu)域 BET 家族的一種有效、高度特異性和 Kac 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。(+)- JQ-1 (100 nM，48 h) 促進(jìn)鱗狀分化，表現(xiàn)為細(xì)胞紡錘形、扁平化和角蛋白表達(dá)增加。與 (-)-JQ1 (250 nM) 和載體對(duì)照相比，(+)-JQ-1 (250 nM) 在經(jīng)處理的 NMC 797 細(xì)胞中誘導(dǎo)角蛋白的快速表達(dá)，如通過(guò)定量免疫組織化學(xué)所確定的。(+)-JQ-1 (與 (-)-JQ1 (250 nM) 相比) 會(huì)引發(fā)經(jīng)處理的 NMC 797 細(xì)胞的時(shí)間依賴性強(qiáng) (3+) 角蛋白染色[1]。添加 (+)-JQ-1 后幾乎立即觀察到自噬基因的去抑制[2]。(+)-JQ-1 是 BET 家族共激活蛋白 BRD4 的一種有效的噻吩二氮卓抑制劑 (Kd=90 nM)，通過(guò) MYC 致癌基因的轉(zhuǎn)錄控制參與癌癥的發(fā)病機(jī)制。(+)-JQ-1 的劑量范圍研究證明有效抑制 H4Kac4 結(jié)合，小鼠 BRDT (1) 的 IC50 值為 10 nM，人 BRDT (1) 的 IC50 值為 11 nM[3]。
體內(nèi)研究
已確定腫瘤的匹配小鼠隊(duì)列隨機(jī)接受 (+)-JQ1 (50 mg/kg) 或載體處理，每日腹膜內(nèi)注射。在隨機(jī)化之前和處理四天之后，通過(guò) FDG-PET 成像評(píng)估小鼠。(+)-JQ1 處理觀察到 FDG 攝取顯著減少。腫瘤體積測(cè)量證實(shí) JQ1 處理可減少腫瘤生長(zhǎng)。(+)-JQ1 的藥代動(dòng)力學(xué)研究是在 CD1 小鼠靜脈內(nèi)和口服給藥后進(jìn)行的。靜脈內(nèi)給藥 (5 mg/kg) 后 (+)-JQ1 的平均血漿濃度-時(shí)間曲線。靜脈內(nèi) (+)-JQ1 的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)顯示出出色的藥物暴露 (AUC=2090 hr*ng/mL) 和大約一小時(shí)的半衰期 (T1/2)。制定口服給藥 (10 mg/kg) 后 (+)-JQ1 的平均血漿濃度-時(shí)間曲線�？诜� (+)-JQ1 的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)表現(xiàn)出出色的口服生物利用度 (F=49%)、血漿峰濃度 (Cmax=1180 ng/mL) 和藥物暴露量 (AUC=2090 hr*ng)/mL)[1]。
實(shí)驗(yàn)參考方法
細(xì)胞測(cè)定
1.細(xì)胞系：使用 NUT 中線癌患者細(xì)胞系（797 和 11060）。 相關(guān)產(chǎn)品推薦：蛋白酶體抑制劑MG-132作用原理
2.培養(yǎng)條件：
797：在含有 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)。
11060：在含有 10% 胎牛血清的 RPMI 培養(yǎng)。
3.處理方案：
細(xì)胞被處理為：
250 nM (+)-JQ1
250 nM (-)-JQ1
等量 DMSO（0.025%）。
4.細(xì)胞收集：
在所需時(shí)間點(diǎn)，以 500× g 離心 5 分鐘，溫度 4°C，獲取 2×10^6 個(gè)細(xì)胞。
用 PBS 清洗細(xì)胞。
5.固定步驟：
將沉淀重懸于 1 mL 冷 PBS 中。
在輕輕渦旋的同時(shí)，將其逐滴加入 9 mL 70% 乙醇中，放入一個(gè) 15 mL 聚丙烯離心管中。
將固定的細(xì)胞在 -20°C 凍存過(guò)夜。
6.離心和清洗：
第二天以 500× g 的速度在 4°C 離心 10 分鐘。
用 3 mL 冷 PBS 清洗細(xì)胞。
7.染色過(guò)程：
將細(xì)胞重懸于 500 μL 溴化丙啶染色溶液中（成分：0.2 mg/mL RNAse A、0.02 mg/mL 溴化丙啶、0.1% Triton-X 在 PBS 中）。
在 37°C 孵育 20 分鐘。
8.數(shù)據(jù)分析：
將樣品轉(zhuǎn)移到冰上，并在 BD FACS Canto II 上進(jìn)行分析。
生成直方圖，并使用 FlowJo 流式細(xì)胞儀分析軟件進(jìn)行細(xì)胞周期分析。
備注：MCE 并未獨(dú)立確認(rèn)這些方法的準(zhǔn)確性。僅供參考。
動(dòng)物給藥方案
小鼠研究
實(shí)驗(yàn)對(duì)象：具有腫瘤的小鼠（CD1 雄性，體重 24-29 g）。
治療方案：
隨機(jī)分為兩組，接受 (+)-JQ1（50 mg/kg）或載體，通過(guò)每日腹腔注射給藥。
額外研究包括：
靜脈尾部注射的單劑量 (+)-JQ1（5 mg/kg）。
口服灌胃研究（10 mg/kg）。
大鼠研究
實(shí)驗(yàn)對(duì)象：成年雄性斯普拉格-道利大鼠。
治療方案：
給藥載體或 (+)-JQ1（10 mg/kg），采用 IP 給藥，劑量為體重的 1/100。
監(jiān)測(cè)：每日檢查死亡情況；在第 1、3、7、14 和 21 天記錄體重。
治療方案調(diào)整因不良反應(yīng)而改變：
初始 4 天每天給予 50 mg/kg JQ1，之后改為每天 10 mg/kg 兩次，持續(xù)至研究結(jié)束。
終點(diǎn)評(píng)估：
完成 3 周治療的動(dòng)物，評(píng)估睪丸質(zhì)量、精子活動(dòng)性和精子計(jì)數(shù)。
睪丸在 Bouin 固定液中固定，以備組織學(xué)分析。
另一半在溫暖的 M16 緩沖液中切碎，用于精子計(jì)數(shù)和活動(dòng)性研究。
備注：MCE 并未獨(dú)立確認(rèn)這些方法的準(zhǔn)確性。僅供參考。
參考文獻(xiàn)
[1]. Filippakopoulos P, et al. Selective inhibition of BET bromodomains. Nature. 2010 Dec 23;468(7327):1067-73.
[2]. Sakamaki JI, et al. Bromodomain Protein BRD4 Is a Transcriptional Repressor of Autophagy and LysosomalFunction. Mol Cell. 2017 May 18;66(4):517-532.e9.
[3]. Matzuk MM, et al. Small-molecule inhibition of BRDT for male contraception. Cell. 2012 Aug 17;150(4):673-84.
標(biāo)簽：
jq1
- 美德聲推出通過(guò)LC-MS/MS擴(kuò)大新生兒篩查的檢測(cè)試劑
- 西美杰正式推出USP/EP標(biāo)準(zhǔn)品采購(gòu)服務(wù)
- 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2025全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)招商函
- MCE推出生命科學(xué)文獻(xiàn)有投必獎(jiǎng)活動(dòng)(腫瘤與癌癥)
- 睿通生物推出新品ML19熔融石英折射率匹配液
- MCE直播：同位素標(biāo)記物示蹤劑與定量?jī)?nèi)標(biāo)品的探索
- MCE邀您參加2024年滿意度有獎(jiǎng)?wù){(diào)查&感恩節(jié)回饋活動(dòng)
- MCE暖冬鉅惠：染料、siRNA65折，享1.5倍牌價(jià)積分
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com