美國藥典第86章“使用重組試劑的細菌內(nèi)毒素測試”常見問題解答

為了幫助行業(yè)更好地理解和實施這一新章節(jié)，美國藥典（USP）提供了針對第<86>章使用“使用重組試劑的細菌內(nèi)毒素測試”的常見問題解答，旨在全面解析和澄清相關(guān)疑問，確保行業(yè)能準(zhǔn)確理解和高效應(yīng)用這一創(chuàng)新試劑進行細菌內(nèi)毒素檢測。以下是對這些問題的詳細梳理：

Q1：如果第<86>章“使用重組試劑進行細菌內(nèi)毒素檢測”是1000以下的章節(jié)，為什么需要按照該章節(jié)的規(guī)定完成附加驗證？
目前，第<86>章中的方法被視為第<85>章“細菌內(nèi)毒素檢測（BET）”的替代方法。替代方法的定義可在一般注意事項6.30中找到:“替代方法或程序是指除相關(guān)物品的藥典方法或程序以外的任何方法或程序。”

由于第<86>章包含替代方法，因此用戶有責(zé)任確保主要方法（非產(chǎn)品特定方法）已經(jīng)過驗證（根據(jù)<1225>藥典程序驗證），并且該方法經(jīng)過驗證，適用于所測產(chǎn)品/材料（根據(jù)<1226>藥典程序驗證），從而確認方法是否適用于檢測特定產(chǎn)品或材料。對于第<86>章，應(yīng)評估供應(yīng)商對檢測試劑盒的主要驗證，以確定其是否符合USP<1225>中要求的方法驗證要求。符合藥典方法驗證要求（第<1226>章包含在第<86>章“準(zhǔn)備檢測”一節(jié)中。

如第<86>章所述，用戶需要查看供應(yīng)商提供的（或內(nèi)部開發(fā)的）主要驗證包，以確保該方法的驗證狀態(tài)適合其預(yù)期用途。成功完成這些步驟（第<86>章中的主要驗證審查和成功完成預(yù)備測試）可用于證明所選方法適用于所測試的特定材料。由于迄今為止使用這些試劑的經(jīng)驗有限，監(jiān)管機構(gòu)可能在驗收前要求提供更多的具體驗證數(shù)據(jù)。

Q2：第<86>章是否與Ph Eur2.6.32協(xié)調(diào)？如果不協(xié)調(diào)，可以協(xié)調(diào)嗎？
對于美國藥典（USP）、標(biāo)準(zhǔn)，跨藥典協(xié)調(diào)工作是通過藥物討論組（PDG）進行的，與ICHQ4B保持一致。

美國藥典（USP）、歐洲藥典（EP）、印度藥典委員會（IPC）和日本藥典（JP）使用鱟源檢測試劑進行的細菌內(nèi)毒素檢測已協(xié)調(diào)一致，為全球和認可主要藥典的市場中的最終用戶帶來了巨大利益。通過PDG進行協(xié)調(diào)是可以實現(xiàn)的，也是人們所期望的；目前正在努力開展討論，以便今后與PDG實現(xiàn)協(xié)調(diào)。

Q3：為什么重組試劑沒有添加到第<85>章？
因為第<85>章是一個與歐洲、印度和日本的相應(yīng)章節(jié)相協(xié)調(diào)的章節(jié)。這些章節(jié)是ICHQ4B的一部分，這意味著它們在ICH地區(qū)的監(jiān)管機構(gòu)內(nèi)被認為是可以互換的。因此，要及時進行修改比較困難。希望協(xié)調(diào)當(dāng)前和未來的rBET章節(jié)；請參閱上面有關(guān)協(xié)調(diào)的問題。

Q4：USP如何評估多種產(chǎn)品和材料的研究數(shù)據(jù)，以證明將第<86>章確立為適用章節(jié)是合理的？
USP通用章節(jié)微生物學(xué)專家委員會的內(nèi)毒素和熱原小組委員會根據(jù)小組委員會的集體專業(yè)知識、現(xiàn)有的同行評審文獻、對公開和提交的機密最終用戶數(shù)據(jù)和驗證的廣泛審查以及政府聯(lián)絡(luò)人的意見制定了第<86>章。繼續(xù)生成rBET數(shù)據(jù)并提交給全球藥典將能夠確定跨產(chǎn)品的適用性。

Q5：為什么重組級聯(lián)試劑（rCR）被納入第<86>章？
USP微生物專家委員會（MEC）內(nèi)毒素小組委員會在廣泛審查公開和提交的機密最終用戶數(shù)據(jù)和驗證以及現(xiàn)有的同行評審文獻的基礎(chǔ)上制定了第<86>章。同行評審文獻中存在大量使用rFC和rCR的BET數(shù)據(jù)，MEC在制定本章時還審查了非公開/保密數(shù)據(jù)。在考慮這些信息的同時，還認識到重組試劑相當(dāng)于天然因子C的生物技術(shù)，而天然因子C是負責(zé)檢測馬蹄蟹內(nèi)毒素的生物傳感器。

此外，rCR酶級聯(lián)始于rFC。綜合所有這些信息和數(shù)據(jù)，MEC一致認為，納入rCR得到了所審查的科學(xué)和數(shù)據(jù)的支持。推進rBET章節(jié)符合USP擴大使用無動物方法和材料的承諾。

Q6：是否需要進行廣泛的可比性/等效性研究，以證明從第<85>章過渡到第<86>章是合理的？
對于大多數(shù)內(nèi)毒素檢測產(chǎn)品來說，不需要進行廣泛的可比性/等效性研究。在大多數(shù)情況下，只需證明產(chǎn)品特定方法的適用性即可，這在實踐中與第<85>章類似�？赡芸倳�有例外情況，這些例外情況應(yīng)基于最終用戶的經(jīng)驗和材料特性。在某些情況下，可與相關(guān)監(jiān)管機構(gòu)一起對方法進行主動審查。

第<86>章采用了與第<85>章相同的內(nèi)毒素容許限度、測量單位和主要參考標(biāo)準(zhǔn)。這與從兔熱原試驗（RPT）過渡到內(nèi)毒素檢測時實施的第<85>章形成鮮明對比，后者沒有這些質(zhì)量控制功能，僅包括動物飼養(yǎng)最佳實踐。

此外，rBET是建立在數(shù)十年成熟的生物技術(shù)科學(xué)基礎(chǔ)之上的，其作用機制相同：rFC是鱟因子C的克隆，細菌內(nèi)毒素的檢測是通過生物傳感器鱟因子C進行的。

Q7：第<86>章的實施是否會影響USP第<151>章熱原檢測法的使用？
第<86>章的引入是USPMEC開發(fā)非動物測試模型的第一步。雖然第<86>章的引入對章節(jié)<151>沒有直接影響，但它為引入可替代動物測試模型的新技術(shù)提供了一個框架。在MEC利益相關(guān)者的支持下，正在探索其他技術(shù)（例如單核細胞活化測試，MAT）以供未來引入。增加新的體外技術(shù)和/或儀器技術(shù)是USP致力于擴大無動物試驗方法和材料使用范圍的一部分。