細(xì)胞凋亡檢測操作流程三--JC-1檢測凋亡細(xì)胞線粒體膜電位改變

1.制備1x106 /ml的細(xì)胞懸液， 濃度不宜過高，因?yàn)槌�過該濃度容易造成細(xì)胞的凋亡。

2.誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)行凋亡的處理，同時(shí)保留一份未經(jīng)誘導(dǎo)的細(xì)胞作為對照。

3.凋亡處理結(jié)束后，每個(gè)無菌的15ml聚苯乙烯離心管中加入1ml細(xì)胞懸液，室溫下，400×g ，離心5分 鐘，棄上清。 

4.每管加入0.5 ml 新鮮配制的JC-1工作液，充分混勻后置于37°C的CO2培養(yǎng)箱，孵育10-15分鐘。

5.按以下步驟洗滌細(xì)胞兩次：
  第一次：每管加體積為2 ml的 1× Assay Buffer，輕輕懸浮細(xì)胞，振蕩或用槍頭使細(xì)胞分散，以免細(xì) 胞聚集成塊。400×g ，室溫離心5分鐘，棄上清。 
  第二次：每管加體積為1ml的 1× Assay Buffer，輕輕懸浮細(xì)胞，振蕩或用槍頭使細(xì)胞分散，以免細(xì) 胞聚集成塊。400×g ，室溫離心5分鐘，棄上清。 

6.每管加體積為0.5 ml的 1× Assay Buffer，輕輕懸浮細(xì)胞，上機(jī)檢測。