2015 版《中國(guó)藥典》農(nóng)殘檢測(cè)的解決方案以及方法包介紹

 

1.1 儀器和試劑

質(zhì)譜儀器：TSQ 8000 Evo 質(zhì)譜儀（賽默飛世爾科技，美國(guó)）；

氣相色譜儀：Trace1310 GC 配 AI l310 自動(dòng)進(jìn)樣器（賽默飛世爾科技，美國(guó)）；

色譜柱：TR-Pesticide II 30 m*0.25 mm*0.25 μm 毛細(xì)管色譜柱（賽默飛世爾科技，美國(guó)）；

試劑：甲苯、丙酮、乙腈，均為色譜純；

 

1.2 儀器方法

氣相方法：

柱溫箱：60 ºC 保持 1 min，以 30 ºC/min 升至 180 ºC，再以10 ºC/min 升至 300 ºC，保持 5 min。

進(jìn)樣口：不分流進(jìn)樣，不分流時(shí)間：1.5 min；

進(jìn)樣口溫度：270 ºC；載氣：恒流，1.2 mL/min；

傳輸線(xiàn)：280 ºC

質(zhì)譜方法：離子源溫度為 300 ºC，采用 T-SRM 方法，具體檢測(cè)離子對(duì)如表 2 所示：

 

表 2. 76 種農(nóng)藥對(duì)照品、監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞電壓（CE）

 

 

注：化合物 10 和 30 為內(nèi)標(biāo)，其余 74 項(xiàng)為目標(biāo)化合物

 

1.3 樣品前處理

1）樣品提取：取供試樣品（藥材或飲片）粉碎成粉末，稱(chēng)取3 g 樣品到 50 mL 離心管中，加入 5 mL 1% 乙酸溶液，渦旋使樣品充分浸潤(rùn)、靜置。再加入10 mL乙腈震蕩混勻，加入 4 g MgSO4、1 g CH3COONa，在渦旋振蕩器上振蕩2 min，冰浴中放置冷卻 5 min，然后在 5000 rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 min。

 

2）樣品凈化：取上清液 8 mL，轉(zhuǎn)移到 15 mL 凈化管，凈化管中包括 900 mg MgSO4、300 mg PSA、300 mg C18、石墨化炭黑 90 mg。旋渦震蕩樣品 1 min，然后在 5000 rpm轉(zhuǎn)速下離心 5 min。準(zhǔn)確取上清液 5 mL，N2 吹儀上于 40 ℃水浴吹干，乙腈定容至 1 mL，直接 GC-MS/MS 分析。

 

1.4 樣品基質(zhì)溶液

按照 1.3 的程序處理藥材樣品，得到空白樣品的基質(zhì)溶液。

 

1.5 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

1）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：在十萬(wàn)分之一分析天平上稱(chēng)取每種農(nóng)藥單標(biāo)化合物 10 mg，加入 10 mL 相應(yīng)的溶劑（根據(jù)不同的化合物加入丙酮、甲苯或者乙腈）溶解，配制成濃度為約 1000 mg/L的溶液。每種單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度根據(jù)稱(chēng)樣量和加入溶劑的體積計(jì)算得到。所有單標(biāo)儲(chǔ)備液在 -20℃ 冰箱中冷凍保存。單標(biāo)儲(chǔ)備液的有效期為 6 個(gè)月。

2）混合標(biāo)準(zhǔn)中間液：移取適量的單標(biāo)儲(chǔ)備液，用乙腈稀釋。中間標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度為10.0 mg/mL。中間標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液在-20 ℃ 冰箱中冷凍保存。中間儲(chǔ)備液的有效期為 3 個(gè)月。

3）工作標(biāo)準(zhǔn)溶液：取適量的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，以空白樣品基質(zhì)液（1.4）依次稀釋成濃度為 5.0、10.0、25.0、50.0、100.0工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

 

2.1 色譜分離結(jié)果

每個(gè)化合物 SRM 質(zhì)譜條件（母離子-子離子-碰撞能量）從TraceFinder 的 CDB 中導(dǎo)出（見(jiàn)表 2），在該條件下運(yùn)行樣品可得到目標(biāo)物的 SRM 總離子流圖見(jiàn)圖 1。

 

 

圖1

 

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性、檢出限及精密度

配置混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，各濃度分別為：5.0、10.0、25.0、50.0、100.0 μg/L 采用上述方法分別進(jìn)樣分析，考察各組分的線(xiàn)性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 74 種農(nóng)藥組分在 5.0~100.0 μg/L 線(xiàn)性關(guān)系良好，線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)均大于 0.99, 對(duì)同一樣品連續(xù)進(jìn)樣 6 針，RSD 在0.37%–4.91%之間，重復(fù)性良好。按照IUPAC 方法規(guī)定計(jì)算各組分檢出限，各組分檢出限在 0.01–2.15 μg/L 之間，根據(jù)本應(yīng)用方法的前處理，其檢出限都滿(mǎn)足最新藥典對(duì)于農(nóng)殘分析檢出限的要求（見(jiàn)表 3）。

 

表 3. 藥材中 74 種農(nóng)殘的線(xiàn)性方程及檢出限

 

 

本文參考藥典前處理方法，建立了氣相串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）測(cè)定藥材中的 74 項(xiàng)農(nóng)殘，樣品前處理只需要 45 min 即可完成，經(jīng)快速前處理后，在 TSQ 8000 Evo 三重四極桿儀器上，通過(guò)一針?lè)治觯��?nbsp;25 min 內(nèi)完成分離和檢測(cè)。以快速的前處理結(jié)合賽默飛的 TSQ 8000 Evo 高通量、高靈敏度的三重四極桿儀器，為藥材的農(nóng)殘分析帶來(lái)高效、準(zhǔn)確、方便易用的解決方案。

 

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