Myc標(biāo)簽融合蛋白-檢測(cè)，封閉應(yīng)用數(shù)據(jù)

Myc 標(biāo)簽融合蛋白 - 檢測(cè)，封閉

Myc Tag來(lái)源于c-myc基因表達(dá)產(chǎn)物，其序列為EQKLISEEDL。以高親和力聞名的Myc Tag的單克隆抗體（克隆號(hào)2D5），可以檢測(cè)天然和變性的Myc融 合蛋白，被廣泛用于WB、IF、IP實(shí)驗(yàn)。在天然洗脫條件下，使用Myc標(biāo)簽多 肽來(lái)與重組蛋白進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)，可溫和洗脫Myc標(biāo)簽蛋白質(zhì)。

Fig.1. Immunofluorescence staining (1:2,000) of Myc fusion protein in 293 cells with red and counterstained with DAPI.

Fig.2.Western blot analysis of 1ug Myc fusion protein with Anti-Myc mouse monoclonal antibody (2D5) in 1:5,000 dilution (lane A) and 1:10,000 dilution (lane B).

Fig.3.IP (1:200) - WB (1:5,000) analysis of Myc fusion protein expression in 293 cells. Untransfected 293 cell lysate (lane A), transfected 293 cell lysate with Myc-tag protein (lane B); IP transfected 293 cell lysate with normal Mouse IgG (lane C) or with Anti Myc tag mAb (lane D) , and without both normal Mouse IgG and Myc tag mAb (lane E).

在1985年開發(fā)出鼠抗c-myc標(biāo)簽抗體并被作為免疫化學(xué)試劑用于細(xì)胞生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域中。Myc標(biāo)簽相當(dāng)于人的c-Myc 410-419位肽段（ 序列為：EQKLISEEDL）。Myc標(biāo)簽可放在C端或N端，但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會(huì)降低蛋白質(zhì)的活力，因此Myc標(biāo)簽系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于檢測(cè)但很少用于純化。Myc標(biāo)簽已成功應(yīng)用于WB雜交技術(shù)、免疫沉淀IP和流式細(xì)胞術(shù)中。因此可用于檢測(cè)重組蛋白在細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳細(xì)胞中的表達(dá)情況。

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