ELISA吸光度值衰減如何巧妙應(yīng)對？

ELISA吸光度值衰減如何巧妙應(yīng)對？

近日的羅老師在操作ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的時候發(fā)現(xiàn)了一個問題，于是來電我公司的售后部門問道：加完顯色液(購買)顯色一定時間后，再加終止液（2M H2SO4，自己配制）后，立即測試其吸光度值，等過幾分鐘再測試吸光度值，發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減。第二次均小于第一次。并且，加終止液時，從第一條加到第12條后，測試發(fā)現(xiàn)，吸光度值從1-12條逐級衰減。前提是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品，并且包被相同蛋白。    

經(jīng)過我公司技術(shù)專員的分析，原來ELISA吸光度值衰減可以這樣巧妙應(yīng)對。    

    其實(shí)具體的原因也很簡單，有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下，終止反應(yīng)后OD值的下降前期不是很明顯。終止后，吸光度值是會隨著時間衰減，所以一般是加完終止液后立即測，這樣比較準(zhǔn)。再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是：

① 顯色時間調(diào)整，如果你現(xiàn)在的顯色時間是10MIN，那調(diào)整到30MIN，再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。    

② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。建議您使用RD品牌的ELISA試劑盒，顯色時間是30分鐘，終止后要求在30分鐘內(nèi)檢測，加入終止液后，最好在加入終止液后2到3分終內(nèi)檢測，這是OD值相對比較高。擬合值能達(dá)到四個9。