蛋白磷酸酶Cdc25組合熒光檢測試劑盒在多種癌癥檢測治療的應用
瀏覽次數(shù):1225 發(fā)布日期:2020-12-1
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我們知道癌癥最重要的特征就是細胞的惡性增殖,而細胞增殖又少不了細胞分裂周期基因(cell division cycle,Cdc)的參與。細胞周期中必需的Cdc25基因所表達的細胞分裂周期因子25(cell division cyclin25,Cdc25)屬于細胞周期調(diào)控蛋白,在真核生物的細胞有絲分裂中起重要調(diào)控作用,是細胞周期關(guān)鍵因子之一,目前,Cdc25也已逐漸成為癌癥治療的潛在靶標。
細胞分裂周期的進程是通過CDC25磷酸酶激活一組特殊的細胞周期依賴性蛋白激酶CDK進行調(diào)控的。CDC25蛋白能特異性地脫去CDKs酪氨酸/蘇氨酸殘基上的磷酸基團去磷酸化,參與細胞周期調(diào)節(jié)并調(diào)控應對DNA損傷,在正常的細胞周期中具有重要的作用。哺乳動物至少有3種CDC25磷酸酶亞型,分別為CDC25A、CDC25B和CDC25C。近年來的研究顯示,CDC25A主要在細胞的G1/S期轉(zhuǎn)變中發(fā)揮作用,CDC25B在S期被激活,繼而在細胞質(zhì)中激活CDK1(Cdc2)/周期蛋白B,被活化的CDK1/周期蛋白B再激活CDC25C,通過正反饋機制調(diào)控有絲分裂。
研究表明,Cdc25在多種癌癥中過表達。Cdc25磷酸酶的兩種亞型Cdc25A和Cdc25B,一種或兩種同時在多種癌癥中過表達,如乳腺癌、肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、食道癌、胃癌、肺癌、肝細胞癌、非小細胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤、胰導管癌、甲狀腺和頭頸癌等.目前也有研究證實CDC25C功能的失調(diào)將導致腫瘤的發(fā)生。因此,以磷酸酶Cdc25為靶標的抑制劑藥物的研發(fā),對于開發(fā)抗腫瘤藥物具有重要意義。
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蛋白磷酸酶Cdc25組合熒光(人)檢測試劑盒原理:熒光底物鄰甲基熒光磷酸酯 (OMFP), 經(jīng)CDC25去磷酸化后得到的產(chǎn)物鄰甲基熒光素 (OMF) 在被482-502nm激發(fā)光激發(fā)后可發(fā)射出波長為510-540 nm的可檢測的熒光信號, 通過觀察熒光信號的強弱,得到抑制劑或調(diào)節(jié)劑對蛋白磷酸酶Cdc25A、Cdc25B和Cdc25C的抑制情況。
細胞分裂周期因子25(Cdc25)檢測試劑盒
結(jié)果1——抑制劑分析
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釩酸鈉對Cdc25A的抑制曲線 |
釩酸鈉對Cdc25B的抑制曲線 |
釩酸鈉對Cdc25C的抑制曲線 |
結(jié)果2——Cdc25酶活分析
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Cdc25A催化結(jié)構(gòu)域重組蛋白的劑量酶活曲線 |
Cdc25B催化結(jié)構(gòu)域重組蛋白的劑量酶活曲線 |
Cdc25C催化結(jié)構(gòu)域重組蛋白的劑量酶活曲線 |
結(jié)果3——Cdc25酶酶動力學分析
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