革蘭氏染色與細菌抗酸染色技術(shù)的操作技巧

革蘭氏染色和抗酸染色都屬于細菌形態(tài)學檢查法，提到革蘭氏染色大家肯定都非常熟悉，但是說到抗酸染色你不一定了解。今天我們進入細菌的花花世界，聊一聊細菌界的這兩大染色法：

 

 

革蘭氏染色（Gram stain）

 

用途：由丹麥病理學家Christain Gram于1884年創(chuàng)立，直到現(xiàn)今，革蘭氏染色法仍是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法。通過革蘭氏染色，可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。

 

原理：細菌經(jīng)龍膽紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的龍膽紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌(G+)由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此，能把復合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈藍紫色；而革蘭氏陰性菌(G-)因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

 

染色結(jié)果：

 

革蘭陽性菌(G+)：藍色

 

革蘭陽性菌(G+)：紅色

 

其他組織：黃色

 

細胞核：紅色

 

 

 

抗酸染色（Acid Fast Bacteria (AFB) Stain）

 

用途： 由埃利希（F.Ehrlich）1882年首創(chuàng)，并經(jīng)F.齊爾（Ziehl）改進而創(chuàng)造出的細菌染色法，用于細菌標本涂片或菌落涂片的染色，目前常用于對分枝桿菌屬進行初步鑒別。

 

原理： 分枝桿菌的細胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)（主要成分為分枝菌酸），包圍在肽聚糖的外面，具有抗酸性，染色時與石炭酸復紅結(jié)合牢固，能抵抗酸性乙醇的脫色作用，,因此抗酸菌能保持復紅的顏色，達到染色目的。未脫色細菌呈紅色為抗酸性細菌，脫色經(jīng)復染呈藍綠色的細菌為非抗酸性細菌。

 

染色結(jié)果：

 

抗酸菌組織：紅色

 

其他細菌及背景：淺綠色

 

 

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