CEM 公司Discover® 2.0在氨基酸水解中的應用

               
                                           

氨基酸分析用于定量各種樣品中的一組基本的營養(yǎng)素。 為了為所有氨基酸的定量提供可靠、可重現(xiàn)和準確的方法，必須同時考慮樣品處理和色譜分離。 在樣品處理中，樣品必須被水解，以便可以測量氨基酸的比例。 可以使用多種水解方案，因為并非所有氨基酸都同樣穩(wěn)定。每個樣品必須經過三種不同的水解方案，即用于確定總蛋白質組成的酸水解、用于測量含硫氨基酸的過甲酸氧化后的酸水解以及用于評估色氨酸回收率的堿水解 。這些水解技術可能非常耗時，完成一個樣品需要長達 24 小時，并且可能還需要特殊設備。
使用美國CEM公司Discover微波氨基酸水解儀器，可以大大改善對水解條件的控制，并具有更好的準確性、重現(xiàn)性、速度和穩(wěn)健性。
                                                 
         圖 1. CEM Discover 2.0 Microwave Reaction System with Explorer Autosampler 

CEM Discover 2.0（圖 1）使用專利環(huán)形單模微波技術水解蛋白質和多肽，為氨基酸分析做準備，最快 15 分鐘完成。

                                              

1. 內置革命性的，專利的iWave 溫度傳感器，可提供樣品本身的準確溫度讀數(shù)。
2. 自動耦合微波腔，微波能量分布自動調整，微波能量可以快速加熱和維持每個樣品的設定溫度；
3. 優(yōu)越的風機系統(tǒng)的性能，完全可調的在線攪拌，均勻的熱量分布；
4. 使用簡單的軟件操作系統(tǒng)；
5.  集成500萬像素的攝像頭；
6. 全自動反應操作，自動采樣器有12個和48個位置模塊，提供完全自動化的反應處理能力；

                                    

                                               圖 2. CEM Discover 2.0

如圖3 所示，樣品溫度由獲得專利的測量， 原位攪拌確保熱量均勻分布在樣品中，反應后可在幾秒鐘內冷卻樣品，以便為進一步處理或分析做好準備。
          

                              

圖3. Process of Microwave Hydrolysis in CEM Discover 2.0

                                             
 

• 稱量300-500 mg樣品到 35 mL 小瓶中。
• 加入 10 mL 6N HCl。
• 蓋上瓶蓋。
• 使用動態(tài)方法控制，設定 0-300 W功率、15 分鐘保持時間、160 °C目標溫度 和 300 psi 目標壓力條件，攪拌應設置為中速。
• 將樣品瓶放入 Discover微波腔并按 Start 鍵開始方法。

                                           

建議使用上述程序中概述的正確樣品量、體積和容器。 樣品的某些成分在水解后會保留在固相中，并且在此過程中通常會變黑，如圖 4 所示。這種情況是正常的，氨基酸會在溶液中。