無血清凍存液凍存MG63細胞的使用方法及注意事項
瀏覽次數(shù):1083 發(fā)布日期:2023-2-13
來源:尚恩生物
細 胞 基 本 信 息
MG63(人骨肉瘤細胞)細胞正常生長形態(tài)照片
提問
MG63可以用無血清凍存液凍存嗎?
回答
可以使用。不同品牌的凍存液凍存效果可能不一樣,建議凍存后次日復(fù)蘇一管檢測細胞活率及狀態(tài)沒有問題后再將剩余凍存細胞放置液氮中保存。
注 意 事 項
不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)
無血清凍存液的使用方法分享:
選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率。
1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于離心管中;
2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù);
3.取所需細胞數(shù)的細胞懸浮液置于離心管中,900rpm離心3min,棄上清;
4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為1x106至2x106 cells/ml,緩慢地混合均勻,制成細胞混合液;
5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標(biāo)示細胞名稱的凍存管中;
6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,過夜冷凍保存,第二天移至-196℃液氮罐。