2D與3D實(shí)時(shí)可視化細(xì)胞趨化實(shí)驗(yàn)操作詳解

瀏覽次數(shù)：767　發(fā)布日期：2024-9-13　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

趨化性試驗(yàn)用于分析某種細(xì)胞類型是否直接向特定趨化因子定向和遷移。由于趨化性在癌癥發(fā)展和免疫浸潤過程中是一個(gè)特別重要的過程，趨化性試驗(yàn)中常用的細(xì)胞類型是癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞。

趨化性試驗(yàn)可以研究：

目的基因敲除、敲低或過表達(dá)后細(xì)胞的趨化行為
物質(zhì)的趨化潛力
趨化性抑制劑和增強(qiáng)劑的作用
趨化性和化學(xué)運(yùn)動(dòng)性之間的區(qū)別（增強(qiáng)遷移）
趨化過程中的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
趨化過程中細(xì)胞骨架的變化

HT-1080細(xì)胞轉(zhuǎn)染LifeAct-TagGFP2 在2D表面上趨化遷移。

2D 與 3D 趨化性檢測

許多細(xì)胞自然生長在3D環(huán)境中。體外培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞附著在平坦的2D表面上，其行為可能與在3D凝膠基質(zhì)中不同。在許多情況下，3D環(huán)境更接近體內(nèi)情況，在規(guī)劃趨化性試驗(yàn)時(shí)應(yīng)考慮到這一點(diǎn)。

使用µ-Slide Chemotaxis，可以輕松在水基凝膠（如Ⅰ型膠原蛋白和 Matrigel）中建立趨化梯度，因?yàn)槟z結(jié)構(gòu)不會(huì)阻礙擴(kuò)散。感興趣可以聯(lián)系我們有關(guān) 3D 趨化性測定的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)的更多信息。

HT-1080 癌細(xì)胞在 2D 表面上粘附（左）并嵌入 3D I型膠原蛋白（右）的顯微鏡觀察示意圖。

ibidi µ-Slide Chemotaxis

在 ibidi µ-Slide Chemotaxis中，細(xì)胞會(huì)遷移，并且可以在連接兩個(gè)大型儲存器的中央通道中觀察到
具有長期穩(wěn)定性的明確線性梯度
實(shí)驗(yàn)起點(diǎn)的細(xì)胞分布均勻
非常適合使用倒置顯微鏡進(jìn)行活細(xì)胞成像
適用于：

- 2D 和 3D 檢測 - 快速和慢速遷移細(xì)胞 - 粘附和非粘附細(xì)胞

使用 µ-Slide Chemotaxis，可以在 3D 凝膠基質(zhì)或 2D 表面上培養(yǎng)細(xì)胞。本示例展示了凝膠基質(zhì)中遷移細(xì)胞的 3D 實(shí)驗(yàn)。

μ-Slide Chemotaxis是為研究快速或緩慢遷移、非粘附或粘附細(xì)胞在 2D 表面或 3D 凝膠基質(zhì)上的趨化行為而開發(fā)的。可以觀察到 48 小時(shí)以上線性和穩(wěn)定濃度分布中的細(xì)胞遷移。由于梯度快速建立，因此還可以測量快速遷移響應(yīng)（發(fā)生在 30 分鐘內(nèi)）。

使用µ-Slide Chemotaxis可以對各種細(xì)胞類型（例如內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞）的遷移行為進(jìn)行詳細(xì)而明確的分析。

參考：

Zengel P, et al. (2011) μ-Slide Chemotaxis: a new chamber for long-term chemotaxis studies. BMC Cell Biol 12:21. 10.1186/1471-2121-12-21.

Biswenger V, et al. (2018) Characterization of EGF-guided MDA-MB-231 cell chemotaxis in vitro using a physiological and highly sensitive assay system. PLoS One 13(9):e0203040. 10.1371/journal.pone.0203040.

傳統(tǒng)Boyden 室 | Transwell 遷移試驗(yàn)存在不足