線粒體呼吸鏈復(fù)合物I、II、III、IV、V活性檢測試劑盒原理介紹

線粒體呼吸鏈復(fù)合物I (NADH氧化酶)、線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸脫氫酶）是電子進入線粒體電子傳遞鏈（ETC）的主要元素。復(fù)合物I催化NADH氧化，復(fù)合物II催化琥珀酸氧化為延胡索酸。隨后，輔酶Q（Q）形成輔酶（QH2），最終導(dǎo)致終端的電子受體O2減少。線粒體呼吸鏈復(fù)合物III(細(xì)胞色素c氧化還原酶)是線粒體氧化磷酸化的必要蛋白質(zhì)。線粒體呼吸鏈復(fù)合物III是線粒體呼吸鏈的守門人和第三活性氧的主要來源。線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV（細(xì)胞色素c氧化酶）是線粒體電子傳遞鏈的終端電子受體。復(fù)合物IV通過細(xì)胞色素c的氧化，將O2轉(zhuǎn)化為水，此過程與線粒體細(xì)胞膜ATP合成有關(guān)。線粒體呼吸鏈復(fù)合物V與上述四個復(fù)合物一起完成氧化磷酸化生成ATP，稱為ATP合成酶，又稱F1F0-ATP酶。

圖1：線粒體呼吸鏈

線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性的抑制會導(dǎo)致嚴(yán)重的線粒體功能失調(diào)，線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性長期抑制可能會導(dǎo)致神經(jīng)性疾病如：帕金森病、唐氏綜合癥、利氏綜合征等。因此，線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性常常作為線粒體毒性誘導(dǎo)的神經(jīng)缺陷性疾病的指示劑。

如何簡單、快速、有效的篩選線粒體呼吸鏈復(fù)合物抑制劑？

廠商：開曼生物

試劑盒：線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性檢測試劑盒系列，該系列涵蓋線粒體呼吸鏈復(fù)合物I、II、III、IV、V的活性檢測。

線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性檢測試劑盒特點：

. 每個試劑盒均提供牛心線粒體，無需另外分離線粒體

. 非常適合抑制物高通量篩選

. 采用比色法，操作簡便、快速

原理展示：

. MitoCheck Complex I Activity Assay Kit（700930）：通過測定復(fù)合物I催化的NADH的氧化速率來反映復(fù)合物I的活性。NADH的氧化速率通過340nm處的吸光值的減少來測定，吸光值的減少與復(fù)合物I的活性成正比。

. MitoCheck Complex II Activity Assay Kit（700940）：在復(fù)合物II催化的琥珀酸氧化反應(yīng)中，使用DCPIP作為染色劑，600nm處吸光值隨著DCPIP的減少而減少。復(fù)合物II的活性通過600nm處吸光值的減少來測定。

. MitoCheck Complex II/III Activity Assay Kit（700950）：通過測定細(xì)胞色素C（550nm處吸光值）反映復(fù)合物III的活性。

. MitoCheck Complex IV Activity Assay Kit（700990）：通過測定細(xì)胞色素C的氧化速率（550nm處吸光值）反映復(fù)合物IV的活性。

. MitoCheck Complex V Activity Assay Kit（701000）：通過測定NADH的氧化速率（340nm處的吸光值）反映復(fù)合物V的活性。