動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用抗凝劑介紹
應(yīng)用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,成為抗凝。阻止血液凝固的化學(xué)試劑稱為抗凝劑。對(duì)抗凝劑的一般要求是用量少、溶解度大、不影響測(cè)定。生化檢驗(yàn)常用的抗凝劑有以下幾種:
1、肝素:肝素是一種含有硫酸基團(tuán)的粘多糖,其抗凝機(jī)制主要是對(duì)抗凝血活酶和凝血酶的形成和活性,阻止血小板聚集。肝素抗凝適用于紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)、血?dú)夥治、血?xì)胞比容試驗(yàn)、血沉及普通生化測(cè)定;不適用于做血凝試驗(yàn)和白細(xì)胞計(jì)數(shù)。使用1.0g/L的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液。肝素抗凝濃度為20~30U/ml全血。
2、草酸鉀-氟化鈉:草酸鉀可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀,從而阻止血液凝固。草酸鉀溶解度大,抗凝作用強(qiáng)。氟離子能結(jié)合鈣而抗凝,但抗凝效果較弱。氟離子可抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解。若未加氟化鈉,血標(biāo)本中葡萄糖含量將以每小時(shí)6%的速度降解。而在氟化鈉的存在下,血糖濃度在25℃可穩(wěn)定24小時(shí),4℃可穩(wěn)定48小時(shí)。因此,草酸鉀-氟化鈉是血糖測(cè)定標(biāo)本常用的抗凝劑。
3、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA):EDTA及其鹽是一種氨基多羧基酸,可以有效的螯合血液標(biāo)本中的鈣離子。螯合鈣或?qū)⑩}從反應(yīng)位點(diǎn)移去將阻滯和終止內(nèi)源性或外源性凝血過程,從而防止血液標(biāo)本凝固。適用于一般血液學(xué)檢驗(yàn)。不適用于凝血試驗(yàn)及血小板功能檢查,亦不適用于鈣離子、鉀離子、鈉離子、鐵離子、堿性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸基肽酶的測(cè)定及PCR試驗(yàn)。EDTA抗凝濃度為3.4~4.8mmol/L全血。
4、枸櫞酸鈉:枸櫞酸鈉能與血液中的鈣離子形成絡(luò)合物,從而阻止血液凝固。常用濃度為109mmol/L或32.06g/L。