在人的大腦中有幾十億條神經(jīng)在活動,他們形成了靈活的連接,這些連接,在學(xué)習(xí)和記憶形成過程的信息處理中,處于穩(wěn)定狀態(tài);反過來,就處于不穩(wěn)定狀態(tài)。神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)和成像是一個特殊的挑戰(zhàn),因為成熟的神經(jīng)元不發(fā)生細(xì)胞分裂,因此神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)培養(yǎng)的一個主要問題是他們的存活期比較短,易受感染,對介質(zhì)蒸發(fā)產(chǎn)生的高滲壓敏感以及觀察全網(wǎng)絡(luò)活性需要數(shù)周至數(shù)月,使得提高體外神經(jīng)元生存能力和延長神經(jīng)元壽命變得極其重要;因上述體外培養(yǎng)的壓力導(dǎo)致用傳統(tǒng)方法對神經(jīng)元活細(xì)胞成像受到很大限制,制約著該領(lǐng)域研究的深入發(fā)展。
3D Cell Explorer 顯微鏡采用360度全息無標(biāo)記成像技術(shù),避免了上述干擾,可極大改善對腦細(xì)胞的基礎(chǔ)研究;檢測過程無需樣品準(zhǔn)備,能夠快速、無創(chuàng)和無偏差的對活細(xì)胞觀測。此外,3D Cell Explorer 的激光使用的能量比傳統(tǒng)熒光成像方法最低能量的激光低100倍,這使得活細(xì)胞長期成像(長達(dá)數(shù)周)成為可能。
視頻1鏈接:https://v.youku.com/v_show/id_XNDQyMDk2MDA2OA==.html?spm=a2h3j.8428770.3416059.1:
視頻2鏈接:https://v.youku.com/v_show/id_XNDQyMDk2MDA2OA==.html?spm=a2h3j.8428770.3416059.1
第一個視頻,我們觀測了培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元生長過程,紫色視頻是數(shù)字化染色后的3D 結(jié)構(gòu)。當(dāng)這些細(xì)胞已經(jīng)成為“成熟的神經(jīng)元”時,它們的分化速度為7div。
第二個短視頻中,3D Cell Explorer 高清晰的觀察到了兩種獨特且屬于海馬神經(jīng)元正常的生理特征:囊泡遷移和神經(jīng)元可塑性的動態(tài)變化,實現(xiàn)神經(jīng)元活細(xì)胞成像研究的新突破。
樣本提供方:the lab of prof. Šuput’s group at the Institute of Pathophysiology, Faculty of Medicine, University of Ljubljana, Ljubljana, Slovenia.
并且通過Nanolive 3D Cell Explorer的精彩活神經(jīng)元視頻拍攝,還觀測到了活的、完全未受干擾的神經(jīng)元的線粒體在軸突、樹突和細(xì)胞核內(nèi)運動的動力學(xué)和行為。這是傳統(tǒng)熒光標(biāo)記方法很難觀測到現(xiàn)象。
視頻3鏈接:https://v.youku.com/v_show/id_XNDQyMDk2MDA2OA==.html?spm=a2h3j.8428770.3416059.1
Nanolive 3D Cell Explorer在神經(jīng)元研究中的優(yōu)勢
﹡非侵入式或無需染色標(biāo)記;
﹡基于細(xì)胞物理折射率的全息3D成像;
﹡實驗處理低于5分鐘,細(xì)胞無損;
﹡1.7秒快速3D全息成像;
﹡任意基于折射率的數(shù)字染色高達(dá)7色;
﹡167nm XY軸超高分辨率;
﹡實時監(jiān)測細(xì)胞特性可達(dá)數(shù)周;
﹡整合3通道熒光, 可與7個數(shù)字染色無縫疊加;