顯微成像與循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）檢測(cè)

01循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）介紹

循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）是指存在于外周血中的各類腫瘤細(xì)胞的統(tǒng)稱。循環(huán)腫瘤細(xì)胞以不同形態(tài)存在于外周血中，既有游離的單個(gè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞，也有聚集成團(tuán)的細(xì)胞團(tuán)（CTM，CirculatingTumor Microemboli），它們是惡性腫痛患者出現(xiàn)術(shù)后復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的重要原因，也是導(dǎo)致腫瘤患者死亡的重要因素。

腫瘤細(xì)胞從腫瘤組織中脫落，在進(jìn)入外周血循環(huán)的過(guò)程中發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變（EpithelialMesenchymal Transition，EMT），并克服自身及血液循環(huán)中各種因素的殺傷作用，到最后定植形成新的轉(zhuǎn)移灶等多個(gè)步驟，使得循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）可順利侵襲轉(zhuǎn)移從而促進(jìn)相關(guān)疾病的進(jìn)展。

02循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)

癌癥的進(jìn)展并非一蹴而就，從基因突變到細(xì)胞團(tuán)，再到更大的“組織”慢慢發(fā)展而來(lái)的。

為了提高癌癥患者的存活率，能在越早期檢測(cè)出來(lái)進(jìn)行干預(yù)，就有越大的可能起到更好的治療效果。因此，作為眾多腫瘤早檢早篩手段中的一種，循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)行業(yè)運(yùn)應(yīng)而生。

而循環(huán)腫瘤細(xì)胞在血液中的含量極少，量級(jí)在血細(xì)胞中＜1/10^-9，因此針對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的篩選富集與檢測(cè)產(chǎn)品各顯神通，以不同的原理實(shí)現(xiàn)早篩目的。

03檢測(cè)原理

市面上的循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)方案多種多樣，各有千秋。其原理大致分為抗體磁珠法、過(guò)濾法和芯片物理法。

1. 抗體磁珠法

抗體磁珠法一般又分為三類設(shè)計(jì)：

一種是正向富集法，主要依賴腫瘤細(xì)胞表面各種標(biāo)志物的表達(dá)（如上皮細(xì)胞標(biāo)志物EpCAM），利用偶聯(lián)在固相載體磁珠上的相應(yīng)抗體或多肽對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行直接捕獲； 

另一種是負(fù)向富集法，通過(guò)低滲裂解紅細(xì)胞及使用偶聯(lián)抗CD45抗體的免疫磁珠去除白細(xì)胞以達(dá)到富集非血源性腫瘤細(xì)胞的目的；

第三種是差相富集法（SE）：使用特殊的非血源性細(xì)胞分離介質(zhì)去除紅細(xì)胞，利用多種抗白細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體的組合群與特殊包被的磁珠相偶聯(lián)從而最大程度去除血液中的白細(xì)胞，差相富集循環(huán)腫瘤細(xì)胞。

通過(guò)這一種篩選出來(lái)的樣本，可以通過(guò)免疫熒光或FISH方法，在熒光顯微鏡下進(jìn)行樣本檢驗(yàn)；

#明美光電研究級(jí)正置熒光顯微鏡MF43-N可以提供優(yōu)質(zhì)的成像，清晰的畫(huà)質(zhì)與優(yōu)良的靈敏度可以為檢測(cè)加以助力。

圖片僅示意拍攝效果，不代表樣品本身為CTCs

研究級(jí)正置熒光顯微鏡MF43-N

2. 膜/芯片過(guò)濾法

使用一定孔徑的細(xì)胞篩進(jìn)行樣品過(guò)濾，可以去除體積較小的白細(xì)胞，從而分離出體積較大的循環(huán)腫瘤細(xì)胞，可以HE染色，對(duì)樣本進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒別，也可以使用免疫組化通過(guò)熒光和明場(chǎng)進(jìn)行判斷。

明美可以提供研究級(jí)倒置熒光顯微鏡MIX60-FL對(duì)孔板細(xì)胞進(jìn)行觀察。

研究級(jí)倒置熒光顯微鏡MIX60-FL

圖片僅示意拍攝效果，不代表樣品本身為CTCs

3. 芯片物理法

根據(jù)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的物理性質(zhì)如密度、細(xì)胞剛性、核質(zhì)比、體積等，搭載微流控芯片進(jìn)行活細(xì)胞富集檢測(cè)。此種方法開(kāi)放下游，可以對(duì)CTC培養(yǎng)傳代，也可以使用各種染色手段。

明美光電產(chǎn)品可以在多維度進(jìn)行產(chǎn)業(yè)結(jié)合。比如在微流控芯片制造檢測(cè)端，明美高速相機(jī)MS16-H可以對(duì)微流控芯片內(nèi)部狀況進(jìn)行高靈敏高幀率抓拍，幀率可達(dá)660fps。

MS16-H高速相機(jī)

微流控芯片攝影（圖片僅示意拍攝效果，不代表樣品本身為CTCs）

在CTC傳代培養(yǎng)領(lǐng)域，明美MSHOT新品活細(xì)胞掃描分析儀MCS31可以對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行無(wú)接觸式、連續(xù)拍攝監(jiān)控，可以對(duì)專領(lǐng)域細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分析、熒光觀察、明場(chǎng)相差觀察、劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞凋亡等，可以在比較困難的細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域探索合適的培養(yǎng)條件，為科研助力。

活細(xì)胞掃描分析儀實(shí)拍

放在二氧化碳培養(yǎng)箱中實(shí)拍

活細(xì)胞掃描分析儀相襯與熒光拍攝（圖片僅示意拍攝效果，不代表樣品本身為CTCs）

明美光電作為顯微成像系統(tǒng)解決方案提供商，在CTC領(lǐng)域可以從上（高速攝影，研發(fā)與檢測(cè)微流控芯片）到下（FISH、免疫組化、CTC培養(yǎng)、細(xì)胞監(jiān)測(cè)）提供全鏈路的解決方案，不僅從硬件滿足多樣的需求，在軟件方面也同步跟上便利化的需要，還以其高性價(jià)比、易于操作和維護(hù)的特點(diǎn)，滿足了行業(yè)中企業(yè)、臨床與科研的需求。我們的方案已經(jīng)在全球10萬(wàn)+用戶中得到應(yīng)用，并且獲得了良好的口碑。

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