牛陀螺狀細(xì)胞貼壁培養(yǎng)技巧
瀏覽次數(shù):905 發(fā)布日期:2019-12-26
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BT牛陀螺狀細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)特性:
1、一個(gè)一個(gè)做!防止污染,和消化細(xì)胞時(shí)間的不均勻。
2、原則上,為了避免細(xì)胞系之間的污染,應(yīng)該一個(gè)一個(gè)的做。但是如果你能保證無(wú)菌操作的原則,也能把握好各種貼壁細(xì)胞系消化的時(shí)間,是可以同時(shí)做,這樣效率高。建議你剛開(kāi)始一個(gè)一個(gè)的做,熟練以后根據(jù)具體情況決定如何做。
3、4個(gè)可以同時(shí)做,時(shí)間到了用移液槍給4個(gè)瓶加含血清的培養(yǎng)基終止就行。
4、新手的話強(qiáng)烈建議一個(gè)一個(gè)處理細(xì)胞,特別是消化,除非你養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)消化都不敏感,不然很容易消化過(guò)度或者不到位。另外同時(shí)處理多個(gè)細(xì)胞容易出現(xiàn)細(xì)胞間交叉污染,一旦污染基本沒(méi)救,比細(xì)菌污染還要麻煩。
5、剛開(kāi)始還是一個(gè)一個(gè)來(lái),BT牛陀螺狀細(xì)胞消化的時(shí)間與細(xì)胞的來(lái)源有很大關(guān)系,貼壁性強(qiáng)的細(xì)胞,需要消化的時(shí)間較長(zhǎng)。一般除了貼壁性強(qiáng)的癌細(xì)胞外,細(xì)胞消化時(shí)間1-3min,還有胰蛋白酶的濃度有關(guān)系,濃度高的消化時(shí)間要短一些,不然會(huì)消化過(guò)了,對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)不好。你可以在分散打入胰蛋白酶時(shí),輕晃培養(yǎng)瓶,在顯微鏡下看見(jiàn)細(xì)胞開(kāi)始變亮,皺縮,卷邊的時(shí)候就加入培養(yǎng)液或者血清終止消化。
選擇牛陀螺狀細(xì)胞有3個(gè)理由:
1、細(xì)胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;
2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),效果更佳。