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逍鵬干細胞來源增殖下游應(yīng)用試劑用法匯總

瀏覽次數(shù)：1065　發(fā)布日期：2023-2-8　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

細胞治療的時代已經(jīng)到來，也成為再生醫(yī)學(xué)與精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的主角。干細胞作為萬能細胞，也是細胞治療的寶貴生物資源。通過對干細胞進行體外分離、純化、培養(yǎng)與擴增，以及定向誘導(dǎo)等過程，在體外培育出全新的、正常的、甚至更年輕的細胞，并最終回輸?shù)饺梭w內(nèi)以達到體態(tài)年輕化、預(yù)防與治療慢性病、抗衰、防癌等目的。

明確定義的干細胞培養(yǎng)體系是目前臨床治療疾病的重要標(biāo)準(zhǔn)，一些廣泛應(yīng)用鼠源基質(zhì)現(xiàn)在正逐漸被替換，從動物源成分的基質(zhì)到無動物源成分，干細胞培養(yǎng)更加精確，細胞治療也會更加安全。

全球干細胞產(chǎn)業(yè)的市場分布已然明朗，從來源到干細胞增殖與下游應(yīng)用，全面覆蓋，滿足科研人員日益研究的需求，干細胞正在發(fā)光發(fā)熱，期待干細胞治療疾病的大眾化。

圖1 全球干細胞產(chǎn)業(yè)線布局

干細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)類

干細胞原代分離提取

原代干細胞分離液

貨號：C3501

品牌：VivaCell

利用特定酶從組織塊分離出原代間充質(zhì)干細胞是常見的細胞培養(yǎng)技術(shù)。原代干細胞分離液利用數(shù)種重組表達的消化酶制備而成，無動物源成分，不含胰酶，對細胞傷害小�？捎行毎饣|(zhì)，可從臍帶、脂肪、胎盤等分離出大量的原代間充質(zhì)干細胞，用于后續(xù)細胞研究。

圖2 原代干細胞分離液測試數(shù)據(jù)（左圖）與產(chǎn)品圖（右圖）

干細胞培養(yǎng)體系

多能干細胞可分化為各種類型的細胞，如神經(jīng)細胞、心肌細胞及軟骨細胞，因此造就了誘導(dǎo)多能干細胞、胚胎干細胞等在人類醫(yī)學(xué)健康應(yīng)用上不可估量的前景。隨著干細胞研究的不斷深入，血清體系逐漸演變?yōu)闊o血清體系，從基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)到干細胞的臨床應(yīng)用，培養(yǎng)體系的成分也越來越明確，也是滿足當(dāng)下疾病治療的新趨勢。其它干細胞培養(yǎng)中使用輔助試劑，比如消化液、凍存液等均符合無動物成分來源，減少動物源成分對干細胞培養(yǎng)的干擾等。

無血清體系下又分為血清替代物和成分明確的添加物，均可以促進干細胞的正常生長與功能表現(xiàn)。其中成分明確的體系還有利于干細胞外泌體相關(guān)的研究，減少或避免血清外源性外泌體對干細胞分泌的干擾，從源頭上解決。而血小板裂解物是由富含血小板的血漿純化萃取而成，其中包含很多不同的細胞生長因子、細胞激素和許多細胞增殖時所需的蛋白質(zhì)，可以用來替代胎牛血清、人類AB血清等。

血小板裂解物（經(jīng)FDA DMF備案）

貨號：PLTGOLD100R

品牌：Mill Creek

圖3 血小板裂解物用于脂肪間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)效果比較

hPSC專用無血清培養(yǎng)基（經(jīng)FDA DMF備案）

貨號：05-100

品牌：BI

圖4 hPSC專用無血清培養(yǎng)基應(yīng)用于不同基質(zhì)上H1胚胎干細胞的培養(yǎng)

MSC無血清培養(yǎng)基（經(jīng)FDA DMF備案）

貨號：05-200（基礎(chǔ)培養(yǎng)基）+05-201（無血清營養(yǎng)添加物）+05-752（促貼壁試劑）

品牌：BI

圖5 MSC無血清培養(yǎng)基應(yīng)用于不同來源MSC的生長培養(yǎng)

重組胰酶

貨號:03-079（重組胰酶）+03-048（大豆胰酶抑制劑）

品牌：BI

圖6 重組胰酶系列產(chǎn)品圖

無血清細胞凍存液（經(jīng)FDA DMF備案）

貨號：05-713/05-714

品牌：BI

圖7 無血清細胞凍存液產(chǎn)品圖

MSC三系分化培養(yǎng)基+染色試劑盒

貨號：05-220/330/440+C37A0/C37B0/C37C0

品牌：BI/VivaCell

圖8 MSC誘導(dǎo)分化成硬骨、脂肪、軟骨的染色結(jié)果圖（由左往右）

細胞外基質(zhì)類

細胞外基質(zhì)可將細胞結(jié)合在一起，并提供一個細胞可增殖、分化和生長的環(huán)境。其中這些細胞外基質(zhì)存在于細胞周圍，也是細胞與細胞間交互作用的中間媒介，對于細胞功能調(diào)節(jié)具有重要作用。常規(guī)用于多能干細胞的體外2D包被培養(yǎng)，用于促進細胞貼壁、生長、調(diào)控分化等。來源相對豐富，含有天然的動物源成分和重組的無動物源成分，以滿足不同階段的干細胞研究。

層粘連蛋白

貨號：LN521/MX521/CT521

品牌：BioLamina

Biolaminin^TM 521作為市場上唯一全長的人類重組層粘連蛋白521基質(zhì)，從科研級別、臨床前級別再到臨床級別，LN521可以精準(zhǔn)替換鼠源基質(zhì)等動物源細胞外基質(zhì)。國內(nèi)外已有多家細胞治療機構(gòu)正在使用臨床級CT521，研究帕金森病、心力衰竭和年齡相關(guān)性黃斑變性等的干細胞療法，推進干細胞治療疾病的進程。

圖9 不同級別的層粘連蛋白521基質(zhì)

干細胞3D培養(yǎng)類

研究人員逐漸意識到了2D培養(yǎng)在預(yù)測許多不同相互作用細胞類型的生物系統(tǒng)的復(fù)雜行為與再現(xiàn)組織的解剖或生理學(xué)等研究中存在的缺點，也正確地認(rèn)識到了3D細胞培養(yǎng)可以更準(zhǔn)確表示出細胞在生物體中經(jīng)歷的自然環(huán)境。體外通過構(gòu)建支架/無支架體系來滿足細胞的3D大規(guī)模生長，其中支架體系較為豐富，比如水凝膠類、微載體類等。可根據(jù)研究方向、支架材料的操作便捷性等影響因素選擇合適的材料進行干細胞的3D擴大培養(yǎng)。另外將多能干細胞或患者來源的腫瘤組織等進行3D細胞培養(yǎng)，從而形成相應(yīng)器官的自組織，并具有自我更新和自我組織的能力，故又稱“平皿里的器官”。類器官屬于3D細胞培養(yǎng)的產(chǎn)物，重現(xiàn)了一個生理上高度相關(guān)的系統(tǒng)，在三維體系下可以研究復(fù)雜的問題。

水凝膠

貨號：VHM02/VHM03/VHM04-K

品牌：TheWell

TheWell VitroGel系統(tǒng)作為有支架的三維培養(yǎng)材料，無動物源成分，室溫下操作，水凝膠系統(tǒng)透明可兼容多種成像系統(tǒng)。配套專用的回收液，可快速回收細胞，同時保持高細胞活率。

圖10 iPSC的3D水凝膠培養(yǎng)流程圖

圖11 MSC的3D水凝膠培養(yǎng)觀察

圖12 小鼠腸類器官的水凝膠培養(yǎng)

干細胞下游應(yīng)用類

細胞治療被認(rèn)為是再生醫(yī)學(xué)中最具有潛力的方法之一，目前全球也有多款干細胞產(chǎn)品獲批上市。干細胞治療安全性仍然存在很大的挑戰(zhàn)，繼而從細胞治療演變?yōu)?ldquo;脫細胞治療”，即注意力轉(zhuǎn)移到干細胞的衍生物——外泌體。目前采用2D培養(yǎng)方式收獲大量細胞上清的學(xué)者占多數(shù)。這種方式收獲的細胞上清中顆粒濃度低，樣本體積大，后續(xù)的純化成本、人力、物力消耗大。但對于基礎(chǔ)研究，基本2D培養(yǎng)方式獲得的外泌體樣本量就可以滿足。另外需要考慮的是不同細胞培養(yǎng)方式可以刺激細胞產(chǎn)生不同表征或內(nèi)含物的外泌體。

FiberCell中空纖維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)

貨號：C2011系列

品牌：FiberCell

中空纖維作用類似于微血管，為細胞提供更類似體內(nèi)（More in-vivo like）的生長環(huán)境。可用于高密度培養(yǎng)細胞回收細胞產(chǎn)物（如外泌體/單抗/重組蛋白生產(chǎn)）等。

干細胞鑒定

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